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神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)
點(diǎn)擊次數(shù)：782 發(fā)布時(shí)間：2016-10-12
神經(jīng)細(xì)胞（神經(jīng)元）不易培養(yǎng)，只有在適宜情況下,，如接種在膠原底層上,，或加入神經(jīng)生長(zhǎng)因子和膠質(zhì)細(xì)胞因子時(shí)，可出現(xiàn)一定程度的分化,，長(zhǎng)出突起等現(xiàn)象,，但很難使之增值。而神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)組織中比較容易培養(yǎng)的成分,。
人,、鼠等腦組織即可用于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)，不僅能獲得生長(zhǎng)的膠質(zhì)細(xì)胞,，也可形成能傳代的二倍體細(xì)胞系,。一般說(shuō)來(lái)，膠質(zhì)細(xì)胞在培養(yǎng)中生長(zhǎng)不穩(wěn)定,，不易自發(fā)轉(zhuǎn)化,，但對(duì)外界因素仍保持很好的敏感性，可用ROUS病毒和SV4等誘發(fā)轉(zhuǎn)化,。
養(yǎng)方法如下：
1,、從手術(shù)室無(wú)菌取腦髓灰質(zhì)或白質(zhì)后，仔細(xì)剝除腦膜,、血管和纖維成分,，置hanks液中漂洗一、二次,。
2,、置于30—50倍體積的hanks液中，此時(shí)腦組織比較柔軟,，反復(fù)吹打即制成細(xì)胞懸液,。
3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后,，細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)快自然下沉,，脂肪等雜物易漂浮，可吸除上層,、反復(fù)二,、三次，即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細(xì)胞成分,。
4,、在沉降物中加入適量培養(yǎng)液，通過(guò)紗網(wǎng)成紗布過(guò)濾,，計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞密度,。
5,、接入培養(yǎng)瓶或皿中，置5%CO2溫箱中培養(yǎng),。
該細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境過(guò)程較長(zhǎng),，接種后貼壁較慢。貼壁后短期內(nèi)也可能不見(jiàn)細(xì)胞分裂現(xiàn)象,，然而一旦生長(zhǎng)后即能迅速進(jìn)入旺盛的增殖狀態(tài),。細(xì)胞傳代可以0.25%胰酶消化處理。