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凝膠色譜柱主要用于相對分子質(zhì)量分布測試

時間:2019-2-20 閱讀:2991
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   凝膠色譜柱主要用于相對分子質(zhì)量分布測試
  凝膠色譜技術(shù)是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離分析技術(shù),由于設(shè)備簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質(zhì)有很高的分離效果,。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法,。凝膠色譜柱主要用于高聚物的相對分子質(zhì)量分級分析以及相對分子質(zhì)量分布測試。目前已經(jīng)被生物化學,、分子生物學,、生物工程學、分子免疫學以及醫(yī)學等有關(guān)領(lǐng)域廣泛采用,不但應(yīng)用于科學實驗研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn),。
  根據(jù)分離的對象是水溶性的化合物還是有機溶劑可溶物,凝膠色譜柱又可分為凝膠過濾色譜(GFC)和凝膠滲透色譜(GPC),。凝膠過濾色譜一般用于分離水溶性的大分子,凝膠過濾色譜柱如多糖類化合物。凝膠的代表是葡萄糖系列,洗脫溶劑主要是水,。凝膠滲透色譜法主要用于有機溶劑中可溶的高聚物相對分子質(zhì)量分布分析及分離,常用的凝膠為交聯(lián)聚苯乙烯凝膠,洗脫溶劑等有機溶劑,。
  凝膠色譜柱不但可以用于分離測定高聚物的相對分子質(zhì)量和相對分子質(zhì)量分布,同時根據(jù)所用凝膠填料不同,可分離油溶性和水溶性物質(zhì),分離相對分子質(zhì)量的范圍從幾百萬到100以下,。近年來,凝膠色譜柱也廣泛用于分離小分子化合物?;瘜W結(jié)構(gòu)不同但相對分子質(zhì)量相近的物質(zhì),不可能通過凝膠色譜法達到*的分離純化的目的,。
  一個含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經(jīng)凝膠色譜柱時,各分子在柱內(nèi)同時進行著兩種不同的運動:垂直向下的移動和無定向的擴散運動。大分子物質(zhì)由于直徑較大,不易進入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時向下移動的速度較快,。小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外,還可以進入凝膠顆粒的微孔中,即進入凝膠相內(nèi),在向下移動的過程中,從一個凝膠內(nèi)擴散到顆粒間隙后再進入另一凝膠顆粒,如此不斷地進入和擴散,小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì),從而使樣品中分子大的先流出色譜柱,中等分子的后流出,分子小的后流出,這種現(xiàn)象叫分子篩效應(yīng),。具有多孔的凝膠就是分子篩。

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