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【江蘇同君】PCR-K640熱循環(huán)儀*,，質(zhì)量保證
PCR-K640熱循環(huán)儀
PCR-K640熱循環(huán)儀 PCR技術(shù)：
聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,簡(jiǎn)稱PCR)是80年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù),。 它具有特異、敏感,、產(chǎn)率高,、 快速、 簡(jiǎn)便,、重復(fù)性好,、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn)；能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬(wàn)乃至百萬(wàn)倍,使肉眼能直接觀察和判斷,；可從一根毛發(fā),、一滴血、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定,。過(guò)去幾天幾星期才能做到的事情,，用PCR幾小時(shí)便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑,。
PCR-K640熱循環(huán)儀 PCR基本原理 ：
基本原理類(lèi)似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：
1,、模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后,，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈,，以便它與引物結(jié)合,，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；
2,、模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,，溫度降至55℃左右,，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；
3、引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,，以dNTP為反應(yīng)原料,，靶序列為模板,，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理,，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程,，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板,。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘,，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍(Plateau),。到達(dá)平臺(tái)期所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝,。
在此同時(shí)認(rèn)識(shí)到蛋白質(zhì)是接受RNA的遺傳信息而合成的,。50年代Zamecnik等在形態(tài)學(xué)和分離的亞細(xì)胞組分實(shí)驗(yàn)中已發(fā)現(xiàn)微粒體(microsome)是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的部位；1957年Hoagland,、Zamecnik及Stephenson等分離出tRNA并對(duì)它們?cè)诤铣傻鞍踪|(zhì)中轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的功能提出了假設(shè),；1961年Brenner及Gross等觀察了在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中mRNA與核糖體的結(jié)合；1965年Holley測(cè)出了酵母丙氨酸t(yī)RNA的一級(jí)結(jié)構(gòu),；特別是在60年代Nirenberg、Ochoa以及Khorana等幾組科學(xué)家的共同努力破譯了RNA上編碼合成蛋白質(zhì)的遺傳密碼,，隨后研究表明這套遺傳密碼在生物界具有通用性，從而認(rèn)識(shí)了蛋白質(zhì)翻譯合成的基本過(guò)程,。
從分子生物學(xué)的發(fā)展過(guò)程,，可以看到在近半個(gè)世紀(jì)中它是生命科學(xué)范圍發(fā)展為迅速的一個(gè)前沿領(lǐng)域,，推動(dòng)著整個(gè)生命科學(xué)的發(fā)展。至今分子生物學(xué)仍在迅速發(fā)展中,，新成果,、新技術(shù)不斷涌現(xiàn)，但分子生物學(xué)的歷史還短，積累的資料還不夠,。例如：在地球上千姿萬(wàn)態(tài)的生物攜帶龐大的生命信息,，迄今人類(lèi)所了解的只是極少的一部分，還未認(rèn)識(shí)核酸,、蛋白質(zhì)組成生命的許多基本規(guī)律,；又如即使到2005年我們已經(jīng)獲得人類(lèi)基因組DNA3×109bp的全序列，確定了人的5-10萬(wàn)個(gè)基因的一級(jí)結(jié)構(gòu),，但是要*搞清楚這些基因產(chǎn)物的功能,、調(diào)控,、基因間的相互關(guān)系和協(xié)調(diào),，要理解80%以上不為蛋白質(zhì)編碼的序列的作用等等,，都還要經(jīng)歷漫長(zhǎng)的研究道路,?？梢哉f(shuō)分子生物學(xué)的發(fā)展前景光輝燦爛,，道路還會(huì)艱難曲折,。
平或放大真核細(xì)胞單拷貝基因，通過(guò)PCR方法都是不難完成的,。
4,、特異性強(qiáng) 作為引物的寡核苷酸與模板結(jié)合的正確性是決定反應(yīng)產(chǎn)物是否特異的關(guān)鍵。
5,、對(duì)原始材料質(zhì)量要求低含微量(pg,ng)的目的DNA的粗制品或者總RNA,，就可以用做反應(yīng)起始材料來(lái)獲取目的產(chǎn)物,。
主要適用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué),、農(nóng)業(yè)科學(xué),、環(huán)境科學(xué),、考古學(xué)及歷史事件解讀和衛(wèi)生安全方面,。
PCR-K640熱循環(huán)儀 技術(shù)參數(shù)：
樣本容量 | 64×0.2ml | 36×0.5ml |
模塊工作溫度范圍 | 0℃-99℃(室溫≤30℃) | 0℃-99℃(室溫≤30℃) |
升溫速率 | ≥3.0℃/s | ≥2.8℃/s |
降溫速率 | ≥2.8℃/s | ≥2.5℃/s |
溫度均一性 | ≤±0.5℃(95℃) | ≤± 0.3℃(20℃-75℃) |
溫度性 | ≤0.1℃ | ≤0.1℃ |
溫度波動(dòng)度 | ≤0.1℃ | ≤0.1℃ |
大循環(huán)數(shù) | 99 | 99 |
耗能(大輸入功率 | 350W | 350W |
外形尺寸(長(zhǎng)×寬×高) | 370mm×249mm×180mm | 370mm×249mm×180mm |
重量 | 4.8kg | 4.8kg |