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上海光學(xué)儀器一廠>>技術(shù)文章>> 相稱顯微鏡是做什么的,?

相稱顯微鏡是做什么的,?

閱讀:596        發(fā)布時間:2019-6-19
相稱顯微鏡是一種增加對比度的方法。可以在不染色的情況下看到活體細(xì)胞,。
 
相稱顯微鏡,,又叫相差顯微鏡(Phase contrast microscopy )。相差是一種增加對比度的方法,,可以在不染色的情況下看到活體細(xì)胞,。
相稱顯微鏡是一種利用光的衍射和干涉現(xiàn)象將透過標(biāo)本的光線光程差或相位差轉(zhuǎn)換成肉眼可分辨的振幅差顯微鏡。提高了密度不同物質(zhì)圖像的明暗區(qū)別,,可用于觀察未經(jīng)染色的細(xì)胞結(jié)構(gòu),。
位相差顯微鏡的原理為何?如何調(diào)整,?
相差成像 
  人的眼睛能夠識別明與暗之差(光的強度)和顏色不同(光的波長不同),,但難以識別差別小的無色的透明物體。 
  光對無色透明物體(相位物體)并不引起明,、暗和顏色的變化,,而只產(chǎn)生所謂的相位差??墒沁@種相位差不能用肉眼識別,,也就看不見這種相位物體了。 
  相差顯微鏡利用阿貝成像原理,,把相位資訊轉(zhuǎn)化為振幅資訊,,是觀察透明物體的關(guān)鍵。 
  光路原理 
  相差光路重要兩個元件是環(huán)形光闌和相位板 
  環(huán)形光闌:不同的環(huán)狀孔形成的光闌,,它們的直徑和孔寬是與不同的物鏡相匹配的,。由于透明圓環(huán)所成的像恰好落在物鏡后焦點平面和相板上的共軛面重合。因此,,未發(fā)生偏斜的直射光便通過共軛面,。其作用是將直射光所形成的像從一些衍射旁像中分出來。 
  相位板:安裝在物鏡的后焦面處,,相板裝有吸收光線的吸收膜和推遲相位的相位膜,。它除能推遲直射光線或衍射光的相位以外,還有吸收光使亮度發(fā)生變化的作用,。
利用位相差聚光鏡及內(nèi)部位相環(huán)所構(gòu)成的環(huán)狀光圈,,產(chǎn)生中空光錐通過聚光鏡、穿過檢體,,經(jīng)過物鏡內(nèi)的光延遲位環(huán)板而成,,因檢體折射指數(shù)不同,造成繞射光束與直射光束發(fā)生干涉作用,,得到明暗對比的效果,。調(diào)整位相差裝置,,先選擇聚光鏡上與物鏡相同倍率之位相差環(huán),所形成的亮環(huán)與物鏡內(nèi)的暗環(huán)配合,,調(diào)整聚光鏡上亮環(huán),,使之重疊即可。
位相稱顯微鏡應(yīng)用
主要提供胚胎形態(tài)的觀察,、胚胎級數(shù)的判別等特殊功用,。解剖顯微鏡,提供睪丸取精之后,,切取組織搜尋精子或采卵時搜尋卵子,,因此臨床應(yīng)用于: 
  ●觀察卵子及胚胎的發(fā)育情形。 
  ●輔助胚胎植入前診斷之細(xì)胞核固定,。 
  ●精蟲顯微注射之應(yīng)用操作,。 
  ●胚胎輔助孵化之應(yīng)用操作。
  相稱顯微鏡的優(yōu)勢:
  我們一般用普通顯微鏡觀察試樣的顯微鏡組織,,是靠試樣表面反射光的強弱(即黑白灰度的不同)來鑒別它,。 
  有的顯微鏡組織由于其反射率和吸收率的不同而產(chǎn)生不同的灰度。反射率較大者,,則組織較明亮:反射率較小者,,組織比較灰暗。 
  當(dāng)試樣上兩相的反射系數(shù)相同,,僅有因輕微侵蝕或各相硬度不同而使拋光時形成微小凹凸,,或者有塑料性變形及第二類共格差別。 
  對此一般生物顯微鏡明場就不易鑒別,,當(dāng)表面高低起伏極小時,,更難辨別,,而相稱技術(shù)成功地解決了這一問題,。一般表面高低差在100~1500Ao(1Ao=0.1NM)范圍內(nèi)均能用相稱顯微鏡來觀察。

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