1,、無菌室應(yīng)設(shè)有無菌操作間和緩沖間,，無菌操作間潔凈度應(yīng)達到10000級,，室內(nèi)溫度保持在20-24℃,，濕度保持在45-60%,。超凈臺潔凈度應(yīng)達到100級。
2,、無菌室應(yīng)保持清潔,，嚴禁堆放雜物,，以防污染。
3,、嚴防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染,，已污染者應(yīng)停止使用。
4,、無菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液,，如5％的甲酚溶液，70％的酒精,，0.1％的新潔爾滅溶液,，等等。
5,、無菌室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔,，以保證無菌室的潔凈度符合要求。
6,、需要帶入無菌室使用的儀器,，器械，平皿等一切物品,，均應(yīng)包扎嚴密,，并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法滅菌。
7,、工作人員進入無菌室前,，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換工作服,，鞋,，帽子，口罩和手套（或用70%的乙醇再次擦拭雙手）,，方可進入無菌室進行操作,。
8、無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上,，并且同時打開超凈臺進行吹風,。操作完畢，應(yīng)及時清理無菌室,，再用紫外燈輻照滅菌20分鐘,。
9、供試品在檢查前,，應(yīng)保持外包裝完整，不得開啟,，以防污染,。檢查前,，用70％的酒精棉球消毒外表面。
10,、每次操作過程中,，均應(yīng)做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性,。
11,、吸取菌液時，必須用吸耳球吸取,，切勿直接用口接觸吸管,。
12、接種針每次使用前后,，必須通過火焰灼燒滅菌,，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物,。
13,、帶有菌液的吸管，試管,，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒,，24小時后取出沖洗。
14,、如有菌液灑在桌上或地上,，應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3％的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘，再做處理,。工作衣帽等受到菌液污染時,，應(yīng)立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌,。
15,、凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后,，才能在水下沖洗,，嚴禁污染下水道。
16,、無菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù),。在超凈工作臺開啟的狀態(tài)下，取內(nèi)徑90mm的無菌培養(yǎng)皿若干,，無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15ml,，放至凝固后，倒置于30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時，證明無菌后,，取平板3～5個,，分別放置工作位置的左中右等處，開蓋暴露30分鐘后,，倒置于30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時,，取出檢查。100級潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個菌落,，10000級潔凈室平均不得超過3個菌落,。如超過限度，應(yīng)對無菌室進行*消毒,，直至重復(fù)檢查合乎要求為止,。