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臺式電動離心機的使用步驟和使用的注意事項
閱讀：1536 發(fā)布時間：2015-11-12
前者是沉降速度法，應(yīng)用該法時液體介質(zhì)的zui大密度要小于樣品中zui小顆粒的密度,，離心時選用高轉(zhuǎn)速和短時間,；后者是沉降平衡法，應(yīng)用該法時液體介質(zhì)的zui大密度要大于樣品中zui小顆粒的密度,，離心時選用較低轉(zhuǎn)速和較長時間,。實際操作有幾種形式：
1.差速離心這種方法是選擇不同轉(zhuǎn)速的離心，分別分離各個不同組分,。例如先用低速沉降大顆粒和上清液,，在高速離心上清沉降中等顆粒，zui后超速離心上清沉降小顆粒,。采用逐級提高離心力分離上情液的方法,，把不同大小的顆粒分開。
這種方法比較簡單,，方便,。分離的組份沉到管底，因此可以迅速濃縮所要的組份,，減少體積,。但回收率和純度是有矛盾的，要提高回收率,，勢必提高轉(zhuǎn)速或延長離心時間,，這樣大小相近的顆粒也會沉到管底。因此該法多用于粗提純或初步濃縮樣品,。
2.速度區(qū)帶(或速度梯度)離心本法是將樣品放在一個連續(xù)的密度梯度液體上,，通過離心，大顆粒沉降快,，小顆粒沉降慢,。經(jīng)過一段時間,，相同的顆粒就在同一深度形成一條帶子，因此把各種組份分開來,。它適用于分離密度相同,、而大小不同的物質(zhì)，如不同的蛋白質(zhì)組份密度都差不多,，但分子量不一樣,，用本法很容易將其分開。但對密度不同,、大小類似的物質(zhì)則不易分離,。蔗糖梯度是一種常用的介質(zhì),。用不同濃度的蔗糖溶液(5%-60%)配成梯度,，用于梯度離心。再分別進行收集處于不同區(qū)帶里的各個組份,。
1.差速離心這種方法是選擇不同轉(zhuǎn)速的離心，分別分離各個不同組分,。例如先用低速沉降大顆粒和上清液,，在高速離心上清沉降中等顆粒，zui后超速離心上清沉降小顆粒,。采用逐級提高離心力分離上情液的方法,，把不同大小的顆粒分開。
這種方法比較簡單,，方便,。分離的組份沉到管底，因此可以迅速濃縮所要的組份,，減少體積,。但回收率和純度是有矛盾的，要提高回收率,，勢必提高轉(zhuǎn)速或延長離心時間,，這樣大小相近的顆粒也會沉到管底。因此該法多用于粗提純或初步濃縮樣品,。
2.速度區(qū)帶(或速度梯度)離心本法是將樣品放在一個連續(xù)的密度梯度液體上,，通過離心，大顆粒沉降快,，小顆粒沉降慢,。經(jīng)過一段時間,，相同的顆粒就在同一深度形成一條帶子，因此把各種組份分開來,。它適用于分離密度相同,、而大小不同的物質(zhì)，如不同的蛋白質(zhì)組份密度都差不多,，但分子量不一樣,，用本法很容易將其分開。但對密度不同,、大小類似的物質(zhì)則不易分離,。蔗糖梯度是一種常用的介質(zhì),。用不同濃度的蔗糖溶液(5%-60%)配成梯度,，用于梯度離心。再分別進行收集處于不同區(qū)帶里的各個組份,。