17-OHCS ELISA
17-OHCS ELISA專業(yè)經(jīng)營進口胎牛血清、細胞因子,、ELISA試劑盒,、細胞、抗體,、生物試劑,、耗材、培養(yǎng)基,、一抗,、二抗、其產(chǎn)品吸附均勻,,吸附性好,,空白值低,孔底透明度高,,代做ELISA實驗等,。完善的庫存及供應體系以及高效穩(wěn)定的純化技術(shù),保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性,。
成分復雜的培養(yǎng)基還含有許多化合物,,包括蛋白質(zhì)、多肽,、核苷,、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物、丙酮酸及脂類等,。已發(fā)現(xiàn)當培養(yǎng)基中的血清濃度減少時,,這些成分都是必需的。既使在使用血清的情況下,,這些成分也可幫助細胞的克隆化培養(yǎng)及維持某些特殊細胞系的生長,。
激素和生長因子在大多數(shù)常規(guī)培養(yǎng)基的配方中都沒有注明,但在無血清培養(yǎng)基中通常要加入它們,,用其來代替血清中的激素能增加多種不同類型細胞的貼瓶率,;生長因子包括FGF家族、EGF,、PDGF,、IGF-1和IGF-2及白介素等,生長因子和細胞因子有著廣泛的特異性,,一般與激素或其它物質(zhì)起相互協(xié)同或加成作用,。另一種常見的添加物就是血清替代物,目前已有許多可*或部分替代傳統(tǒng)培養(yǎng)液中血清成分的商業(yè)產(chǎn)品,,其穩(wěn)定性較好,,但批次間仍有差別,產(chǎn)品的成分也不很確定,。
怎樣查到一個特定細胞株的相關(guān)知識和培養(yǎng)條件,?
ATCC(American Type Culture Collection)收集了絕大多數(shù)細胞的詳細資料。打開ATCC網(wǎng)頁的Cells and hybridomas鏈接,,輸入細胞名稱就可以搜索ATCC的細胞數(shù)據(jù)庫,。數(shù)據(jù)庫中有每一種細胞的詳細描述,包括細胞的來源,,培養(yǎng)和凍存條件,,以及相關(guān)文獻等資料。
如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基,?
培養(yǎng)某類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件,。MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣容易生長,??傊?MEM,、DMEM做貼壁細胞培養(yǎng),;RPMI1640做懸浮細胞培養(yǎng);各種目的無血清培養(yǎng)*AIMV培養(yǎng)基(SFM),。
試劑分裝保存
包括營養(yǎng)液,、胰酶、血清等,。
血清特別重要,。血清必須貯存于 –20℃,如果一次無法用完一瓶,,可將 40~50ml 分裝于無菌酸處理瓶中,,甚至置青霉素瓶保存。一般廠商提供的血清為無菌,,不需再無菌過濾,。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,,勿直接過濾血清,。(一般情況下不影響細胞培養(yǎng))
瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃ 冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),,使溫度與成分均一,,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解凍,,因溫度改變太大,,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。
細胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些,?判定標準是什么,?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,,細胞丟失,、破損、漏液等,,重發(fā),;
(2)凍存的細胞復蘇后,,絕大多數(shù)細胞未存活,,重發(fā);
?。?)存活的細胞靜置24小時后,,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā),;
?。?)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,,重發(fā),;
(5)視具體情況而定,。
細胞出現(xiàn)問題,,不予以重發(fā)的情況有哪些?
?。?)客戶造成細胞污染,,不重發(fā);
?。?)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,,不重發(fā);
?。?)細胞狀態(tài)不好,,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā),;
?。?)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
?。?)細胞收到2天內(nèi),,未告知,不重發(fā),;
?。?)視具體情況而定。