“李鬼”細胞荼毒科研,，科學家指出被污染細胞系使生物醫(yī)學遭受嚴重損失，細胞的身份至關(guān)重要,。Rb細胞,，上海乾思生物公司細胞近3000種，來源于美國ATCC,細胞都是經(jīng)過嚴格質(zhì)量控制,，在中國大陸努力搭建正牌細胞與國內(nèi)廣大科研人員之間的溝通橋梁,。為您提供Rb細胞外，還有更多相關(guān)實驗產(chǎn)品,，標準品,，細胞株和實驗技術(shù)服務等等前期后續(xù)服務。

　　1. Rb細胞液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好,？還是冷凍好,？

　　要冷藏！,！因為液體培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時,，其溶液的pH值會發(fā)生改變，溶液往往變堿,，某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年。

　　2.Rb細胞 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用，及使用方法,。

　　幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求，細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),，在缺少谷氨酰胺時,，細胞生長不良而死亡。所以,，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺,。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應置-20 ?C冰凍保存,，用前加入培養(yǎng)基中,。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,，應重新加入原來量的谷氨酰胺?；A醫(yī)學細胞中心在其服務項目中配制分裝了高濃度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支）,。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中，其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基,。包裝為粉紅色,，-24?C保存。

　　3. Rb細胞 培養(yǎng)用液pH對細胞生長的影響

　　由于,，大多數(shù)細胞適宜pH為7.2~7.4,，偏離此范圍對細胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細胞對pH的要求也不*相同,，原代培養(yǎng)細胞一般對pH變動耐受差,，無限細胞系耐受力強。

　　但總體來說,，細胞耐酸性比耐堿性強一些,，偏酸環(huán)境中更利于細胞生長。因此,，我們在配制培養(yǎng)用液時,，可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。液體在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時,，溶液的pH還會向上浮動0.2左右,。

　　4.Rb細胞 細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎？

　　不見得,！因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH,、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關(guān),。通常情況下,，pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強。另外,，鈣,、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進行傳代消化前,，一定要用D-Hanks液或PBS液反復沖洗細胞培養(yǎng)瓶,，以便于將含血清的培養(yǎng)基沖洗干凈，這樣就能大大提高消化液的消化能力,。本中心通常使用的消化液濃度為：

　?。?）０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　?。?）０.２５％胰蛋白酶＋０.０３％ＥＤＴＡ,。

　?。?）0.25% 胰蛋白酶

　　溶液ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配制,。

　　多數(shù)細胞傳代消化可使用０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ這種消化液,。

　　購買上海乾思生物細胞注意事項（乾思生物）發(fā)布

　　一,、客戶收到細胞先不開蓋,，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張）,，排除細胞本身污染的情況,；

　　收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞,。

　　二,、如為貼壁細胞，請在顯微鏡下觀察細胞密度：

　　1. 未超過80%匯合度時,，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,，噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作,；然后打開蓋子,，先把培養(yǎng)基吸出10ml左右，放在離心管里,，然后瓶口過火（嚴禁直接傾倒）,，這樣可以保證不污染，再用10ml的移液管,，將剩余的培液全部吸出,，放于離心管中，培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了,。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細胞生長情況調(diào)整）之后,，傳代或者凍存。

　　2. 超過80%匯合度時,，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng),。具體步驟如下：

　　1) 棄去培養(yǎng)液，用3ml PBS（不含鈣,，鎂離子）洗1-2次,；

　　2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,，細胞隨即脫落下來,；

　　3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出,，分到新的培養(yǎng)瓶中,，按要求分瓶。

　　三,、如為懸浮細胞,，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,，吸出上清,，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。

　　注意：換液時一半用我們的培養(yǎng)基,，一半用你們的,，以免細胞不適應而造成生長不好。

　　四,、細胞出現(xiàn)問題,，可重發(fā)的情況有哪些？判定標準是什么,？

　?。?）細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失,、破損,、漏液等，重發(fā),；

　?。?）凍存的細胞復蘇后，絕大多數(shù)細胞未存活,，重發(fā),；

　　（3）存活的細胞靜置24小時后,，絕大多數(shù)細胞未存活,，重發(fā)；

　?。?）凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,，出現(xiàn)污染，重發(fā),；

　?。?）視具體情況而定,。

　　五、細胞出現(xiàn)問題,，不予以重發(fā)的情況有哪些,？

　　（1）客戶造成細胞污染,，不重發(fā),；

　　（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,，不重發(fā),；

　?。?）細胞狀態(tài)不好,，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā),；

　?。?）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā),；

　?。?）細胞收到2天內(nèi)，未告知,，不重發(fā),；

　　（6）視具體情況而定,。

　　六,、售后服務政策

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,，超低比價,，另常備  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常備現(xiàn)貨 ；貨期短,，價格優(yōu),，售后齊全。

　　細胞污染問題,，請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),，給我們提出真實的實驗結(jié)果；細胞活性問題,，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,，我們調(diào)查核實后予免費調(diào)換，不收取任何費用,。

　　需要客戶提供Rb細胞細胞培養(yǎng)說明,、細胞操作處理方法,、細胞質(zhì)量問題反饋表。

　　如用戶收到細胞8-30天之內(nèi),，因處理不當造成細胞死亡或污染,，我公司將優(yōu)惠價重新提供一株原細胞

　　Rb細胞質(zhì)量可靠，售后有保障

　　★我?guī)旒毎?000種,，來源于美國ATCC,細胞都是經(jīng)過嚴格質(zhì)量控制,。

　　凍存細胞時間為5-7個工作日，活細胞為7-15個工作日,。

　　★由于細胞庫現(xiàn)有細胞類目多,，為了不出現(xiàn)混亂錯誤，需要了解Rb細胞相關(guān)細胞價格及詳細資料請老師,，對您造成的不便還請見諒,！

（編輯：tanxi）