補充：如果需要提取的樣品比較多（比如1g），研磨好的樣品在后續(xù)的提取中,，需要轉(zhuǎn)移到大的epp管中,，研磨時可以加入較少的抽提液，研磨完畢按照1g樣品10ml提取液補充抽提液,，進行后續(xù)的操作,。
組織研磨儀可在1-3分鐘內(nèi)對硬性,、軟性、彈性等樣品進行快速有效的干磨或濕磨,，亦可達到對粉體及混濁液混合,、均相化的目的，還可以進行低溫液氮冷凍研磨,，也可以進行生物細胞破碎和DNA/RNA提取,。組織研磨機可研磨的樣品種類包括：植物組織、動物組織,、細胞,、細菌、芽孢和酵母等,。
組織研磨儀采用上下垂直高速振蕩模式,，可快速促進細胞快速破碎、細胞裂解,、組織均勻,，使樣品研磨更加均勻；對樣品研磨的重復(fù)性更好,，樣品間無交叉污染,，節(jié)省時間和人工成本，是一種效率很高的樣品預(yù)處理設(shè)備,。其還具有冷凍組件,，可滿足用戶研磨和保存溫度敏感樣品的需求。
組織研磨儀工作原理
組織研磨儀本質(zhì)是二維振動球磨儀,，是通過振動的方式來實現(xiàn)對樣品的粉碎研磨,。研發(fā)生產(chǎn)的組織研磨儀，其工作區(qū)域安裝有兩個可高頻次振動(每分鐘可達1500次)的搖臂,，搖臂形似機械手,，可放置球磨罐或研磨適配器。
設(shè)備工作時,，兩只搖臂作"∞"形運動,，即水平擺動，其帶動球磨罐內(nèi)部的研磨球,，賦予其動能,，研磨球在容器內(nèi)進行高頻次、無規(guī)則的運動,，實現(xiàn)對樣品的撞擊和擠壓,，完成粉碎和研磨。
組織研磨儀詳細的操作步驟如下：
1,、在離心管中加入樣品,、研磨球,、裂解液（可省）,，蓋上蓋,；
2、將裝好樣品的離心管放入適配器中,；
3,、將適配器及裝有樣品的離心管浸入液氮中進行預(yù)冷凍；
4,、將適配器裝到主機上,，鎖緊固定裝置；
5,、觀賞防護罩,，按需求設(shè)定好參數(shù)后，開始研磨,；
6,、等儀器*停止振動后關(guān)機,，打開安全門,，取出樣品；
7,、儀器歸位,。
組織研磨儀工藝技術(shù)：
平整度：
工件的平整度取決于磨盤的平整度。隨著加工領(lǐng)域的不斷深化及精度和效率要求越來越高：“WEIANDA"從鑄鐵盤,、合成盤,、銅盤、純錫盤,、樹脂盤發(fā)展到金剛石盤,，并通過各種方法把盤的平面訂修到佳達2um。
粗糙度：
表面粗糙度取決于磨料顆粒的大小,、形狀和磨盤的材料,， 以及工件材質(zhì)及硬度。
粗磨：
利用較粗顆粒度的磨料在磨盤與工件面上磨削,，進刀量大,、效率高；但磨削面較粗,，適用于磨削余量較多之工作,。
中磨：
利用中度顆粒的磨料在磨盤與工件面上磨削，進刀量快,、效率高,，表面粗糙度適中,，適合磨削量一般之工件。
精磨：
利用較細顆粒度的磨料在磨盤中與工件面上磨削,，進刀量較小,、表面光潔度好，磨削痕均勻而細,。
軟拋光：
利用磨盤上加裝一個特殊材料拋光墊或拋光布,，拋光料在拋光墊或拋光布之間運動，使工件比硬拋光更有超鏡子一樣的高光潔度,。
硬拋光：
利用合成盤,、銅盤、錫盤,、樹脂盤等非常高精密度的基面加入微米級金剛石磨料,，使工件表面變得既高精密平面度，又有像鏡子一樣的高光潔度,。
組織研磨儀的使用方法：
1,、將儀器放置在干燥通風(fēng)的環(huán)境中，插上電源,，觀察儀器控制顯示器是否正常亮燈,。打開儀器，測試控制按鈕是否能正常使用,，儀器空載運行時是否有異響,。
2、將適量樣品和研磨球放入球磨罐中,，預(yù)留一定的研磨空間,。初次研磨建議保持樣品和研磨球各占球磨罐容積的三分之一。
3,、若需要預(yù)冷凍,，可將裝有樣品的球磨罐放入液氮環(huán)境中冷卻3分鐘以上，然后再裝入儀器進行研磨,。使用液氮進行預(yù)冷凍時,，應(yīng)做好防護措施，防止被凍.傷,。
4,、將球磨罐放入高通量組織球磨儀的夾具內(nèi)，慢慢轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)輪,，依靠自動定位的緊固裝置固定好球磨罐,，蓋上蓋子。
5,、在控制顯示器上設(shè)定好研磨儀的運行時間和擺動頻次,，開始研磨,。研磨完成后，轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)輪取下球磨罐,。
組織研磨儀可對硬性,、中硬性和脆性樣品進行細粉碎和精細研磨，還適用于軟性,、彈性,、纖維質(zhì)材料的研磨前處理。既可干磨,，也可濕磨,，還可進行冷凍低溫研磨，在農(nóng)業(yè),、生物醫(yī)藥,、食品、地質(zhì)化工,、環(huán)境,、質(zhì)檢、高?？蒲械榷鄠€行業(yè)的實驗室都有廣泛應(yīng)用,。
一、 實驗試劑：
1.CTAB抽提液：
2%（w/v）CTAB
100 mmol/L Tris-HCl(pH8.0)
20 mmol/L EDTA(pH8.0)
1.4 mol/L NaCl
抽提含多酚較多的植物材料時（比如木本植物）,，上述抽提液中可另加入2%的PVP（聚乙烯吡咯烷酮）,。
抽提液于室溫保存,，可在幾年內(nèi)保持穩(wěn)定,。臨用之前向裝有上述抽提液的試管中加入約2%-3%（v/v）的β-巰基乙醇。
2,、醋酸鈉：
3 mol/L NaAc
用冰乙酸調(diào)pH值至4.8-5.2,。
3、TE溶液：
4,、其它：
無水乙醇,，異丙醇，75％乙醇,，酚：氯仿：異戊醇（25：24：1）,，氯仿：異戊醇（24：1），β-巰基乙醇,，重蒸水,。
二、 實驗步驟
1. 樣品研磨
1) 取1g的樣品放入2ml ep管中
2) 加入1-2粒5mm研磨珠
3) 加入1ml的CTAB 抽提液
4) 將加有樣品的ep管放入高通量組織研磨儀的適配器中,，蓋好
5) 將研磨轉(zhuǎn)速調(diào)到1800,，設(shè)定研磨時間為90秒（可根椐樣品的研磨的難易程度來調(diào)節(jié),，此數(shù)據(jù)是以銀杏落葉為樣本得出）
6) 啟動研磨儀對樣品進行研磨（根據(jù)不同的樣品，本身性質(zhì)不同,，需要對研磨頻率和研磨時間進行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整）
2. DNA的粗提
1) 將研磨好的樣品取出于65℃水浴45min,，中途間隔（輕柔）振蕩三次混勻
2) 冷卻后加入等體積氯仿：異戊醇（24：1），輕柔顛倒混勻使乳化10min
3) 7000g-8000g離心10min（18-20℃）
4) 吸取上清于另一干凈的離心管中
5) （根據(jù)需要可用氯仿：異戊醇如上法重復(fù)抽提一次,，吸取上清）
6) 加入與上清液等體積（且已于-20℃預(yù)冷的異丙醇,，顛倒混勻，約1至2分鐘后應(yīng)有白色絮狀沉淀出現(xiàn)（若沒有,，則加入上清液1/5至1/10體積的pH4.8-5.2的3M NaAc,混勻,，于－20℃冰箱中沉淀30min）
7) 離心法沉淀DNA
8) 在75%乙醇中漂洗DNA數(shù)分鐘以上，用Tip頭吸干乙醇
9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次
10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現(xiàn)半透明,，不要過度干燥
11) 用50μlTE溶解沉淀,，可用65℃水浴助溶，DNA粗提物可用于粗略PCR等,。
3. DNA的純化
1) 向TE溶解的DNA粗提物中入4-10μl RNaseA(約40-100μg)
2) 于37℃酶解RNA 1hr或65℃酶解RNA 30min以上
3) 加入50μl酚：氯仿：異戊醇（25：24：1）,，輕輕顛倒混勻10min
4) 10000g以上常溫離心10min，吸取上清
5) 加入50μl仿氯：異戊醇（24：1）輕輕顛倒10min
6) 10000g以上常溫離心10min,，吸取上清 (根據(jù)需要可重復(fù)用氯仿：異戊醇如上法再抽提1-2次,，以充分去除蛋白和酚)
7) 向上清中加入1/5-1/10體積的pH4.8-5.2的3M NaAc,并加入2.5倍體積無水乙醇，于－20℃沉淀30min以上
8) 12000g,、4℃低溫離心10min,吸干液體
9) 沉淀用75％乙醇漂洗二次
10) 沉淀于室溫或64℃以下恒溫箱中干燥片刻至剛開始出現(xiàn)半透明狀,，勿過度干燥加入50μl重蒸水溶解DNA，可于65℃水浴助溶
11) 取5μl DNA電泳檢查DNA的質(zhì)量
12) 100-500倍稀釋后于分光光度計上測定OD260及OD280,，分析DNA的濃度和質(zhì)量
13) 保存DNA于-20℃
補充：如果需要提取的樣品比較多（比如1g）,，研磨好的樣品在后續(xù)的提取中，需要轉(zhuǎn)移到大的epp管中,，研磨時可以加入較少的抽提液,，研磨完畢按照1g樣品10ml提取液補充抽提液，進行后續(xù)的操作,。
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