典型樣品:動植物組織、植物葉片,、礦石,、土壤、玻璃,、陶瓷,、橡膠、塑料制品,、固體廢棄物,、電子廢棄物、紙張,、紡織品,、化學品、藥片,、中藥材,、食品等。
振動球磨儀采用上下垂直高速振蕩模式,,可快速促進細胞快速破碎,、細胞裂解、組織均勻,使樣品研磨更加均勻,;對樣品研磨的重復性更好,,樣品間無交叉污染,節(jié)省時間和人工成本,,是一種效率很高的樣品預處理設備,。其還具有冷凍組件,可滿足用戶研磨和保存溫度敏感樣品的需求,。
一,、工作原理
振動球磨儀是通過振動的方式來實現(xiàn)對樣品的粉碎研磨。其工作區(qū)域安裝有兩個可高頻次振動(每分鐘可達1500次)的搖臂,,搖臂形似機械手,,可放置球磨罐或研磨適配器。
設備工作時,,兩只搖臂作"∞"形運動,,即水平擺動,其帶動球磨罐內部的研磨球,,賦予其動能,,研磨球在容器內進行高頻次、無規(guī)則的運動,,實現(xiàn)對樣品的撞擊和擠壓,,完成粉碎和研磨。
二,、振動球磨儀詳細的操作步驟如下:
1,、在離心管中加入樣品、研磨球,、裂解液(可?。w上蓋,;
2,、將裝好樣品的離心管放入適配器中;
3,、將適配器及裝有樣品的離心管浸入液氮中進行預冷凍,;
4,、將適配器裝到主機上,,鎖緊固定裝置,;
5,、觀賞防護罩,,按需求設定好參數(shù)后,開始研磨,;
6、等儀器*停止振動后關機,,打開安全門,,取出樣品,;
7,、儀器歸位,。
三、工藝技術:
1,、平整度:
工件的平整度取決于磨盤的平整度,。隨著加工領域的不斷深化及精度和效率要求越來越高:“WEIANDA"從鑄鐵盤,、合成盤,、銅盤,、純錫盤,、樹脂盤發(fā)展到金剛石盤,并通過各種方法把盤的平面訂修到佳達2um,。
2,、粗糙度:
表面粗糙度取決于磨料顆粒的大小,、形狀和磨盤的材料,, 以及工件材質及硬度,。
3、粗磨:
利用較粗顆粒度的磨料在磨盤與工件面上磨削,,進刀量大,、效率高;但磨削面較粗,,適用于磨削余量較多之工作,。
4、中磨:
利用中度顆粒的磨料在磨盤與工件面上磨削,,進刀量快,、效率高,表面粗糙度適中,,適合磨削量一般之工件,。
5、精磨:
利用較細顆粒度的磨料在磨盤中與工件面上磨削,,進刀量較小,、表面光潔度好,磨削痕均勻而細,。
6,、軟拋光:
利用磨盤上加裝一個特殊材料拋光墊或拋光布,拋光料在拋光墊或拋光布之間運動,,使工件比硬拋光更有超鏡子一樣的高光潔度,。
7、硬拋光:
利用合成盤,、銅盤,、錫盤、樹脂盤等非常高精密度的基面加入微米級金剛石磨料,,使工件表面變得既高精密平面度,,又有像鏡子一樣的高光潔度。
四,、組織研磨儀的使用方法:
1,、將儀器放置在干燥通風的環(huán)境中,插上電源,,觀察儀器控制顯示器是否正常亮燈,。打開儀器,測試控制按鈕是否能正常使用,,儀器空載運行時是否有異響,。
2,、將適量樣品和研磨球放入球磨罐中,預留一定的研磨空間,。初次研磨建議保持樣品和研磨球各占球磨罐容積的三分之一,。
3、若需要預冷凍,,可將裝有樣品的球磨罐放入液氮環(huán)境中冷卻3分鐘以上,,然后再裝入儀器進行研磨。使用液氮進行預冷凍時,,應做好防護措施,,防止被凍.傷。
4,、將球磨罐放入振動球球磨儀的夾具內,,慢慢轉動轉輪,依靠自動定位的緊固裝置固定好球磨罐,,蓋上蓋子,。
5、在控制顯示器上設定好研磨儀的運行時間和擺動頻次,,開始研磨,。研磨完成后,轉動轉輪取下球磨罐,。
振動球磨儀可對硬性,、中硬性和脆性樣品進行細粉碎和精細研磨,還適用于軟性,、彈性,、纖維質材料的研磨前處理。既可干磨,,也可濕磨,,還可進行冷凍低溫研磨,在農業(yè),、生物醫(yī)藥,、食品、地質化工,、環(huán)境、質檢,、高??蒲械榷鄠€行業(yè)的實驗室都有廣泛應用。
五,、 實驗試劑:
1.CTAB抽提液:
2%(w/v)CTAB
100 mmol/L Tris-HCl(pH8.0)
20 mmol/L EDTA(pH8.0)
1.4 mol/L NaCl
抽提含多酚較多的植物材料時(比如木本植物),,上述抽提液中可另加入2%的PVP(聚乙烯吡咯烷酮),。
抽提液于室溫保存,可在幾年內保持穩(wěn)定,。臨用之前向裝有上述抽提液的試管中加入約2%-3%(v/v)的β-巰基乙醇,。
2、醋酸鈉:
3 mol/L NaAc
用冰乙酸調pH值至4.8-5.2,。
3,、TE溶液:
4、其它:
無水乙醇,,異丙醇,,75%乙醇,酚:氯仿:異戊醇(25:24:1),,氯仿:異戊醇(24:1),,β-巰基乙醇,重蒸水,。
六,、 實驗步驟
1. 樣品研磨
1) 取1g的樣品放入2ml ep管中
2) 加入1-2粒5mm研磨珠
3) 加入1ml的CTAB 抽提液
4) 將加有樣品的ep管放入高通量組織研磨儀的適配器中,蓋好
5) 將研磨轉速調到1800,,設定研磨時間為90秒(可根椐樣品的研磨的難易程度來調節(jié),,此數(shù)據是以銀杏落葉為樣本得出)
6) 啟動研磨儀對樣品進行研磨(根據不同的樣品,本身性質不同,,需要對研磨頻率和研磨時間進行適當?shù)恼{整)
2. DNA的粗提
1) 將研磨好的樣品取出于65℃水浴45min,,中途間隔(輕柔)振蕩三次混勻
2) 冷卻后加入等體積氯仿:異戊醇(24:1),輕柔顛倒混勻使乳化10min
3) 7000g-8000g離心10min(18-20℃)
4) 吸取上清于另一干凈的離心管中
5) (根據需要可用氯仿:異戊醇如上法重復抽提一次,,吸取上清)
6) 加入與上清液等體積(且已于-20℃預冷的異丙醇,,顛倒混勻,約1至2分鐘后應有白色絮狀沉淀出現(xiàn)(若沒有,,則加入上清液1/5至1/10體積的pH4.8-5.2的3M NaAc,混勻,,于-20℃冰箱中沉淀30min)
7) 離心法沉淀DNA
8) 在75%乙醇中漂洗DNA數(shù)分鐘以上,用Tip頭吸干乙醇
9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次
10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現(xiàn)半透明,,不要過度干燥
11) 用50μlTE溶解沉淀,,可用65℃水浴助溶,DNA粗提物可用于粗略PCR等,。
3. DNA的純化
1) 向TE溶解的DNA粗提物中入4-10μl RNaseA(約40-100μg)
2) 于37℃酶解RNA 1hr或65℃酶解RNA 30min以上
3) 加入50μl酚:氯仿:異戊醇(25:24:1),,輕輕顛倒混勻10min
4) 10000g以上常溫離心10min,吸取上清
5) 加入50μl仿氯:異戊醇(24:1)輕輕顛倒10min
6) 10000g以上常溫離心10min,,吸取上清 (根據需要可重復用氯仿:異戊醇如上法再抽提1-2次,,以充分去除蛋白和酚)
7) 向上清中加入1/5-1/10體積的pH4.8-5.2的3M NaAc,并加入2.5倍體積無水乙醇,于-20℃沉淀30min以上
8) 12000g、4℃低溫離心10min,吸干液體
9) 沉淀用75%乙醇漂洗二次
10) 沉淀于室溫或64℃以下恒溫箱中干燥片刻至剛開始出現(xiàn)半透明狀,,勿過度干燥加入50μl重蒸水溶解DNA,,可于65℃水浴助溶
11) 取5μl DNA電泳檢查DNA的質量
12) 100-500倍稀釋后于分光光度計上測定OD260及OD280,分析DNA的濃度和質量
13) 保存DNA于-20℃
補充:如果需要提取的樣品比較多(比如1g),,研磨好的樣品在后續(xù)的提取中,,需要轉移到大的epp管中,研磨時可以加入較少的抽提液,,研磨完畢按照1g樣品10ml提取液補充抽提液,,進行后續(xù)的操作。
振動球磨儀:高效,、均勻,、可控的樣品破碎方法
在科學研究和工業(yè)生產中,樣品的處理是非常關鍵的步驟,。組織研磨儀是一種能夠高效,、均勻、可控地破碎樣品的設備,,廣泛應用于生物學,、醫(yī)學、材料科學等領域,。
一,、工作原理
振動球磨儀主要基于高速旋轉的研磨球對樣品進行破碎。在研磨過程中,,樣品被放置在研磨球和研磨腔之間,,通過高速旋轉的研磨球對樣品進行沖擊和摩擦,使樣品破碎成更小的顆粒,。這種研磨方式能夠有效地保護樣品的原始結構和成分,,提高實驗的準確性和可靠性。
二,、技術特點
高效性:能夠快速將樣品破碎成均勻的細小顆粒,,提高實驗效率。
均勻性:研磨球在樣品表面高速旋轉,,產生高能量碰撞和摩擦,,使樣品破碎成更小的顆粒,保證樣品的均勻性,。
可控性:研磨過程可以通過調節(jié)研磨球的數(shù)量,、大小以及旋轉速度進行控制,實現(xiàn)樣品的精細破碎,。
保護性:能夠有效地保護樣品的原始結構和成分,,提高實驗的準確性和可靠性,。
方便性:操作簡單,易于控制,,能夠保證實驗結果的重復性和可比較性。
三,、應用場景
生物學應用:在生物學領域,,組織研磨儀被廣泛應用于組織樣品的破碎和制備,如動物組織,、植物組織等,。通過對組織樣品的破碎和磨碎,為后續(xù)的生物化學分析,、基因組學和蛋白質組學研究提供均一,、穩(wěn)定的樣本。
材料科學應用:在材料科學領域,,組織研磨儀被用于對各種材料進行破碎和磨碎,,以獲得具有特定物理和化學性質的粉末或顆粒。例如,,對陶瓷,、金屬、高分子材料等進行破碎和磨碎,,以制備具有特定粒度和組成的復合材料或納米材料,。
醫(yī)學應用:在醫(yī)學領域,組織研磨儀被用于對生物醫(yī)學樣品進行破碎和制備,,如病理組織,、生物細胞等。通過對樣品進行破碎和磨碎,,為后續(xù)的醫(yī)學研究和診斷提供準確的數(shù)據支持,。
其他應用:除了上述應用領域外,組織研磨儀還被廣泛應用于食品工業(yè),、制藥工業(yè),、環(huán)境監(jiān)測等領域。例如,,在食品工業(yè)中,,組織研磨儀可用于對食品原料進行破碎和磨碎,以提高食品的口感和營養(yǎng)價值,;在制藥工業(yè)中,,組織研磨儀可用于對藥物原料進行破碎和磨碎,以制備具有特定藥效的藥物顆粒,。
振動球磨儀是一種高效,、均勻、可控的樣品破碎方法,,廣泛應用于各個領域,。通過對樣品的破碎控制和均勻處理,,能夠為后續(xù)的分析和測試提供穩(wěn)定的數(shù)據支持,提高實驗和生產的效率和質量,。
應用組織研磨儀:從生物學到材料科學的研究儀器
組織研磨儀是一種重要的實驗設備,廣泛應用于生物學,、醫(yī)學,、材料科學等多個領域。它通過高速旋轉或振動,,將組織樣品研磨成均勻的細粉末,,以便進行后續(xù)的分析和實驗。本文將探討應用組織研磨儀在生物學和材料科學領域中的應用及其重要性,。
一,、生物學研究
在生物學研究中,組織研磨儀被廣泛應用于樣品的制備和預處理,。例如,,在基因組學和蛋白質組學研究中,需要對動植物組織,、微生物樣品等進行研磨和破碎,,以釋放出其中的DNA、RNA和蛋白質等生物分子,。通過組織研磨儀的研磨作用,,可以快速、有效地將樣品破碎成細粉末,,提高樣品的提取效率和實驗的準確性,。
此外,組織研磨儀還被廣泛應用于免疫學,、病理學等領域的研究,。例如,在免疫學研究中,,需要對免疫細胞進行分離和純化,,而組織研磨儀可以用于破碎免疫器官和細胞,提高細胞的分離效率和純度,。在病理學研究中,,組織研磨儀可以用于制作病理切片,對疾病進行診斷和治療,。
二,、材料科學研究
在材料科學研究中,組織研磨儀也具有廣泛的應用,。例如,,在材料合成和制備領域中,,需要對原材料進行破碎和混合,以制備出具有特定結構和性能的材料,。組織研磨儀可以通過調整研磨時間和研磨力度等參數(shù),,控制材料的粒度和分布,提高材料的制備效率和性能,。
此外,,組織研磨儀還被廣泛應用于材料的表征和分析中。例如,,通過組織研磨儀的研磨作用,,可以將材料表面粗糙度降低,提高材料的表面平整度和光滑度,。同時,,通過對材料進行破碎和混合,可以制備出具有特定結構和組成的材料樣品,,以便進行X射線衍射,、電子顯微鏡等分析測試。
總之,,應用組織研磨儀是生物學,、醫(yī)學、材料科學等多個領域中重要的實驗設備之一,。通過高速旋轉或振動,,它可以將組織樣品研磨成均勻的細粉末,提高樣品的提取效率和實驗的準確性,。同時,,應用組織研磨儀還可以控制材料的粒度和分布,提高材料的制備效率和性能,。