人MCP-1ELISA試劑盒產(chǎn)品介紹：

產(chǎn)品名稱：人MCP-1ELISA試劑盒,；人單核細胞趨化蛋白-1 ELISA試劑盒,；人MCP-1ELISA檢測試劑盒；人單核細胞趨化蛋白-1酶免試劑盒

英文名稱：Human MCP-1 ELISA KIT

方法：一步法ELISA/兩步法ELISA

規(guī)格：48T/96T

試劑盒來源：采用純進口試劑和進口工藝流程

人MCP-1ELISA試劑盒（兩步法）重復(fù)性好,、質(zhì)量穩(wěn)定,、特異性請,、靈敏度高等優(yōu)點

操作步驟：

1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,，在*、第二孔中分別加標準品100μl,，然后在*,、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻,；然后從*孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三,、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,，再各取50μl分別加到第五,、第六孔中，再在第五,、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,，混勻；混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中，再在第七,、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl,，濃度分別為240ng/L,，160ng/L ，80ng/L,，40ng/L,， 20ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）,、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用,。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外,。

7. 溫育：操作同3,。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 

10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。

2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%

檢測范圍：                                              

15ng/L -300ng/L 

人MCP-1ELISA試劑盒（一步法）精準,、快速,、穩(wěn)定等優(yōu)點

操作步驟

1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；

3. 樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL,；空白孔不加,。

4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5 次（也可用洗板機洗板）,。

6. 每孔加入底物A,、B 各50μL，37℃避光孵育15min,。

7. 每孔加入終止液50μL，15min 內(nèi),，在450nm 波長處測定各孔的OD 值,。

試劑盒性能

1. 準確性：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值，大于等于

0.9900,。

2. 靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL,。

3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性：板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%,。

5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存,。

6. 有效期：6個月

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