生長特性

貼壁  上皮樣

培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基：ENDOTHELIAL CELL MEDIUM(Sciencell,1001)

溫度：37℃     氣相：95%空氣,5% CO2

傳代

1. 用75%酒精噴灑整個培養(yǎng)瓶消毒,，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行1-2小時的緩沖，.然后置于無菌操作臺,，打開瓶口,，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基(以T25培養(yǎng)瓶為例)并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代,，一般2到3天換一次液,；

2.待細胞長至80-90%時，需要對其進行傳代,，推薦傳代比例為1:3至1:4 ,；

3傳代步驟：將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°預熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS,，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1 ml預熱好的胰酶,，置于37°孵育消化（*次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,，以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為佳消化時間,，記錄佳消化時間,，以便于下次消化），消化好后加入3ml*培養(yǎng)基終止消化,。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,，使之*脫落，然后收集細胞懸液,，1200rpm離心5min,，棄上清，加入*培養(yǎng)基重懸細胞,，進行傳代,。

保存

凍存條件：80%*培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO

(備注：建議使用本公司的冷凍液（H-W-100），用4度保存的冷凍液直接重懸細胞,，不能預熱后使用,。)

保存條件：液氮存儲

供應限制

僅供研究之用

常見問題及解決方案

1.培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細胞極大可能會污染,，所以我們會及時安排幫老師解決,。

2.收到細胞后盡快更換為含新鮮培養(yǎng)基，不可使用瓶內(nèi)舊培養(yǎng)基

3.細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。1-2小時后觀察,，如細胞大部分又貼回瓶底,，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉,，留8-10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代,；如細胞還是不貼壁,，將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察,，我們的技術人員會一直跟蹤指導,，直到問題解決。

Mcf-7/ADR

人乳腺癌阿霉素耐藥細胞株

1640+10%FBS+1%P/S+500ng/ml ADR

K562/ADR

人慢性骨髓性白血病耐藥細胞株

1640+10%FBS+1%P/S+1ug/ml ADR

SGC-7901/DDP

人胃癌細胞順鉑耐藥株

1640+10%FBS+1%P/S+1ug/ml DDP

HeLa/DDP

人宮頸癌細胞順鉑耐藥株

1640+10%FBS+1%P/S+1ug/ml DDP

PC-9/GR

人肺腺癌細胞吉非替尼耐藥株

H9c2(2-1)

大鼠胚胎心肌細胞

DMEM+10% FBS

A7r5

大鼠胸大動脈平滑肌細胞

DMEM+10% FBS

PC-12(高分化)

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)

RPMI-1640+10% FBS

C6

大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞

F-12K+10% FBS

RLE-6TN

大鼠肺泡Ⅱ型細胞

RPMI-1640+10% FBS

BRL 3A

大鼠正常肝細胞

DMEM+10% FBS

NRK-52E

大鼠腎小管導管上皮細胞

DMEM+10% FBS

IEC-6

大鼠小腸隱窩上皮細胞

DMEM+10% FBS+0.1u/ml insulin

RBL-2H3

大鼠嗜堿性白血病細胞

DMEM+15%熱滅活FBS

UMR-106

大鼠骨肉瘤細胞

DMEM+10% FBS

RSC96

大鼠雪旺細胞

DMEM+10% FBS

NR8383

大鼠肺泡巨噬細胞

F12K+15%FBS（熱滅活）+2 mM L-谷氨酰胺

HBZY-1

大鼠腎小球系膜細胞

DMEM+10% FBS

MDA-MB-231-GFP

人乳腺癌細胞-綠色標記

DMEM+10% FBS

MDA-MB-468-RED

人乳腺癌細胞-紅色標記

L15 +10%FBS

CNE1-LUC

人鼻咽癌細胞-熒光素酶標記

RPMI-1640+10% FBS

MCF7-GFP

人乳腺癌細胞-綠色標記

DMEM+10% FBS

HELA-GFP

人宮頸癌細胞-綠色標記

DMEM+10% FBS

B16-F10--RED

小鼠皮膚黑色素瘤細胞-紅色標記

RPMI-1640+10% FBS

4T1-LUC

小鼠乳腺癌細胞-熒光素酶標記

RPMI-1640+10% FBS

SK-MEL-2-LUC

人皮膚黑色素瘤細胞熒光標記

MEM+10% FBS

MDA-MB-231

人乳腺癌細胞

DMEM+10% FBS

SPC-A-1

人肺癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

Eca-109

人食管癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

THP-1

人髓系白血病單核細胞

RPMI-1640+10% FBS

K562

人慢性骨髓性白血病細胞

RPMI-1640+10% FBS

PC-3

人前列腺癌細胞

F-12K+10% FBS

A549

人非小細胞肺癌細胞

F-12K+10% FBS

NCM460

人正常結(jié)腸上皮細胞

RPMI-1640+10% FBS

HCT-15

人結(jié)腸癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

COLO 320DM

人結(jié)直腸腺癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

COLO 320

人結(jié)腸癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

COLO 201

人結(jié)直腸腺癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

Caco-2

人結(jié)直腸腺癌細胞

DMEM+20% FBS

BEAS-2B

人支氣管上皮細胞

DMEM+10% FBS

Raji

人Burkitt's淋巴瘤細胞

RPMI-1640+10% FBS

Daudi

人Burkitt's淋巴瘤細胞

RPMI-1640+10% FBS

RAMOS

人B淋巴細胞瘤細胞

RPMI-1640+10% FBS

T84

人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞

DMEM/F12+10% FBS

c666-1

人鼻咽癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

HepG2.2.15

表達HBV病毒的人肝癌細胞

MEM+10% FBS+0.4mg/ml G418

T47D

人乳腺導管癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

SK-BR-3

人乳腺癌細胞

DMEM（高糖）+10% FBS

HT-29

人結(jié)腸癌細胞

McCoy’s 5A+10% FBS

PLC/PRF/5

人肝癌亞力山大細胞

DMEM+10% FBS

L-02（HL-7702)

人正常肝細胞

RPMI-1640+20% FBS

SGC-7901

人胃癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

786-O

人腎透明細胞癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

MDCK(NBL-2)

犬腎細胞

DMEM+10% FBS

UMNSAH/DF-1

雞胚胎成纖維細胞

DMEM+10% FBS

CHO-K1

中國倉鼠卵巢細胞

F12K+10%FBS

COS-7

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞

DMEM+10%FBS

ST

豬睪丸細胞

MEM+10% FBS

CHL

中國倉鼠肺細胞

DMEM+10%FBS

PK-15

豬腎細胞

MEM+10% FBS

VERO

非洲綠猴腎細胞

DMEM+10%FBS

PT-K75

豬鼻甲黏膜成纖維細胞

DMEM+10%FBS

NIH/3T3

小鼠胚胎成纖維細胞

DMEM+10% FBS

B16

小鼠黑色素瘤細胞

RPMI-1640+10% FBS

U14

小鼠宮頸癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

4T1

小鼠乳腺癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)

小鼠淋巴瘤細胞

DMEM+10% FBS

C2C12

小鼠成肌細胞

DMEM+10% FBS

Bend.3

小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞

DMEM+10% FBS

Min6

小鼠胰島β細胞

RPMI-1640+10% FBS

J774A.1

小鼠單核巨噬細胞

DMEM+10% FBS

H22

小鼠肝癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

ID8

小鼠卵巢癌細胞

DMEM+10% FBS

GC-2spd

小鼠精母細胞

RPMI-1640+10% FBS

DC2.4

小鼠樹突狀細胞

RPMI-1640+10% FBS

NIT-1

小鼠胰島素瘤β細胞

F-12K+10%FBS

EL4

小鼠淋巴瘤細胞

DMEM+10% HS 馬血清

TM4

小鼠睪丸Sertoli細胞

DMEM/F12+10% FBS

BV2

小鼠小膠質(zhì)細胞

DMEM/F12+10% FBS

RAW264.7

小鼠單核巨噬細胞白血病細胞

DMEM + 10% FBS

3T3-L1

小鼠胚胎成纖維細胞

DMEM+10% CS

HT22

小鼠海馬神經(jīng)元細胞

DMEM+10% FBS

Pan02

小鼠胰腺癌細胞

RPMI-1640+10% FBS

MC3T3-E1  Subclone 14

小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14

MEMα +10% FBS