H3255細(xì)胞價格NCI-H3255人肺癌細(xì)胞株 慧穎庫存現(xiàn)貨 全國各地均可銷售 采用誠信順豐或聯(lián)邦快遞運送,,確保全國各地隔日到達(dá)客戶手中
【中文名稱】人肺癌細(xì)胞株
【英文名稱】NCI-H3255或H3255
【來源】美國ATCC
【代數(shù)】3-5代
【細(xì)胞檢測】細(xì)胞不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌
【細(xì)胞凍存】液氮凍存(基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS
【細(xì)胞運輸】干冰運輸(1 Vial)或活細(xì)胞運輸(T-25 flasks)
H3255細(xì)胞價格NCI-H3255人肺癌細(xì)胞株 生物體、生長特性,、疾病,、來源、器官,、類型,、形態(tài)、培養(yǎng)條件,、應(yīng)用,、系、組織,、凍存條件等細(xì)胞說明書資料,,請找細(xì)胞老師 王 !
注意,,新復(fù)蘇的細(xì)胞不要經(jīng)常去看去動,。
換液的話,只要把培養(yǎng)基吸出,,再加入新的培養(yǎng)基就可以了
如果復(fù)蘇的細(xì)胞長得很不均勻,,可以胰酶消化下來再混勻后在重新加進(jìn)去(像正常細(xì)胞一樣做)
復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化,,避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,,對細(xì)胞造成損害。
收到細(xì)胞株包裹時,, 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形,, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng),, 或立即冷凍保存(置于–70 °C,, 隔夜后, 移到liq N2),。
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冷凍細(xì)胞解凍程序:
依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類,、血清種類和其它之成份和比例,, 制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,, 若因?qū)嶒炐枰?必須有所不同時,, 務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成, 確定細(xì)胞適應(yīng)后,, 方進(jìn)行所需之實驗,。
FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清),,對細(xì)胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單之血清種類培養(yǎng)之,。
將培養(yǎng)基置于 37 °C水槽中回溫,,回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之, 移入無菌操作臺內(nèi),。取出冷凍管,, 立即放入37 °C 水槽中快速解凍, 水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,, 否則易發(fā)生污染,。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化后, 以70 % ethanol 擦拭冷凍管外部,, 移入無菌操作臺內(nèi),。
依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取 10 ml培養(yǎng)基加至 T25或 T75 flask中,。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,,緩緩加入T25 或T75 flask 內(nèi)之培養(yǎng)基, 混 合均勻,,放入37 °C,,5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
對絕大多數(shù)細(xì)胞而言,,1 % 以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,,不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,,待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可,。唯對極少數(shù)因?qū)MSO 敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO 者,, 則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養(yǎng)基中,離心300 xg (約1000 rpm),,5 分鐘,小心移去上清液,,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,, 轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,, 再放入37 °C, 5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng),。收到T25 flask 細(xì)胞時,, 處理方式為︰
1. 于寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,,T25 flask 均加滿培養(yǎng)基,。請檢查flask 外觀,,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,, 不要打開蓋子,,請立即通知細(xì)胞實驗室。
2. 將原封之T25 flask 靜置于37 °C,, 5 % CO2 培養(yǎng)箱中,,使細(xì)胞回溫至37 °C, 并讓運送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長,。隔天后,,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基,(取出之培養(yǎng)基可以再使用),,僅留約5-10ml 培養(yǎng)基于flask 內(nèi),,依 一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中或細(xì)胞已長滿盤, 則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng),。
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