L929細胞,，小鼠成纖維細胞株

公司所提供的實驗細胞及其子代,，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療,。

細胞狀態(tài)不好解決方法：培養(yǎng)基一次不要配太多,，根據(jù)用量決定。

細胞外源微生物的污染：細胞不宜長期體外培養(yǎng),，因為外源微生物污染的幾率大大提高,。易發(fā)現(xiàn)和難發(fā)現(xiàn)的，影響細胞狀態(tài),。

建議：實驗前凍存一批細胞,，隔幾個月重新復(fù)蘇。既保證實驗所用細胞代數(shù)*,，又將外源污染的后果降到zui低,。

致電或電聯(lián) 咨詢L929細胞的傳代次數(shù)、報價,、以及技術(shù)咨詢,、L929細胞的說明書等等。

相關(guān)培養(yǎng)液原料（）

1640培養(yǎng)基（GIBCO,貨號11875093） +10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+2mM  L-G(L-谷氨酰胺)+1mM  Sodium pyruvate+10mM   HEPES(gibco.,。貨號,。15630-080)

DMEM高糖培養(yǎng)基（GIBCO,貨號11995065）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+4mM  L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸鈉1,HEPES(gibco.。貨號,。15630-080)

E,MEM培養(yǎng)基（GIBCO,貨號11095080）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+NEAA(非必需氨基酸)+2mM  L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸鈉）

F12K培養(yǎng)基 （GIBCO,貨號11765054）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+2mM  L-G(L-谷氨酸胺)

McCoy's 5a培養(yǎng)基（GIBCO,貨號16600082）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

L 15培養(yǎng)基（Hyclone,貨號SH30525.01）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

DMEM/F12培養(yǎng)基（GIBCO,貨號11330032）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

IMDM培養(yǎng)基（GIBCO,貨號C12440500BT）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

L929細胞,，小鼠成纖維細胞株 步驟：

（一）凍存

1、消化細胞（同實驗二）,，將細胞懸液收集至離心管中,。

2、1000rpm離心10分鐘,，棄上清液,。

 3、沉淀加含保護液的培養(yǎng),，計數(shù),，調(diào)整至5×106/ml左右。

4,、將懸液分至凍存管中,，每管1 ml。 

5,、將凍存管口封嚴,。如用安瓿瓶則火焰封口,，封口一定要嚴，否則復(fù)蘇時易出現(xiàn)爆裂,。

6,、貼上標簽，寫明細胞種類,，凍存日期,。凍存管外拴一金屬重物和一細繩,。 

7,、按下列順序降溫：室溫→4℃（20分鐘〕→冰箱冷凍室（30分鐘）→低溫冰箱（－30℃ 1小時）→氣態(tài)氮（30分鐘）→液氮。 

注意：操作時應(yīng)小心,，以免液氮凍傷,。液氮定期檢查，隨時補充,，不能揮發(fā)干凈,，一般30立升的液氮能用1～1.5月。

（二）復(fù)蘇 

1,、準備一個茶缸或1000ml的燒壞,，內(nèi)裝2/3杯37℃的溫水。 

2,、從液氮中取出凍存管,、迅速置于溫水中并不斷攪動。使凍存管中的凍存物在1分鐘之內(nèi)融化,。 3,、打開凍存管，將細胞懸液吸到離心管中,。 4,、1000rpm離心10分鐘，棄去上清液,。 

5,、沉淀加10ml培養(yǎng)液，吹打均勻,，再離心10分鐘,，棄上清液。 

6,、加適當培養(yǎng)基后將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,，37℃培養(yǎng)，第二天觀察生長情況,。

L929細胞,，小鼠成纖維細胞株 相關(guān)主要產(chǎn)品:

鵪鶉纖維肉瘤細胞株QT6

小鼠骨髓瘤B淋巴細胞株SP2/MIL-6

小鼠胰腺癌細胞株LTPA

小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝株P(guān)T-67

小鼠淋巴瘤細胞株L5178YTK+/-clone3.7.2C

小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細胞株MA-891

小鼠胃癌細胞株MFC

鼠肝癌細胞株MM45T.Li

小鼠肝癌細胞株Hepa1-6

小鼠胸腺瘤細胞株EL4

小鼠膠質(zhì)瘤細胞株9L

小鼠膠質(zhì)瘤細胞株RAW264.7

小鼠肝癌細胞株hepA1-6

小鼠垂體瘤細胞株AtT20

小鼠乳腺癌細胞株C127

大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株C6-121

大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株C6-1752

大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株C6-64

大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株C6-70

大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株C6-D2B

小鼠肺癌Lewis瘤株

小鼠肺腺癌細胞株LA795

小鼠胰腺腺泡細細胞株MPC-83

小鼠胰腺腺泡細胞株MPC-83瘤株

小鼠β胰島素瘤細胞株RIN-m5F

小鼠乳腺癌細胞株MA891

小鼠自發(fā)高乳腺癌細胞株TA2

小鼠宮頸癌細胞株U14

小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株G422

小鼠腹水瘤S180瘤株

小鼠白血病細胞株C3

小鼠淋巴瘤細胞株YAC-1

小鼠肺上皮細胞株TC-1

大鼠肉瘤細胞株WistarW256

小鼠巨噬細胞株Ana-1

小鼠小膠質(zhì)瘤細胞株Bv-2

大鼠胰島素瘤細胞株INS-1

大鼠肺泡巨噬細胞株NR8383

小鼠單核巨噬細胞株J774A.1

大鼠胰腺癌細胞株DSL-6A/C1

L929細胞,，小鼠成纖維細胞株 試劑和器材 

器材：液氮罐、凍存管（塑料螺口凍存管或安瓿瓶）,、離心管,、吸管、離心機等 試劑：0.25％胰酶,、培養(yǎng)基,、含保護劑的培養(yǎng)基（即凍存液） 凍存液配制： 培養(yǎng)基加入甘油或DSMO，使其終濃度達5—20%,。保護劑的種類和用量視不同細胞而不同,。配好后4℃下保存。