BALL-1細(xì)胞,，人B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞簡介：

細(xì)胞株名稱：BALL-1，人B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

種屬：人

生長特性：懸浮生長

形態(tài)特征：淋巴細(xì)胞樣

微生物及支原體檢測：陰性

細(xì)胞背景：該細(xì)胞系來源于一典型的人B淋巴細(xì)胞白血病病人,。

來源：日本INKEN中心

安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù),，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄,。

BALL-1細(xì)胞，人B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞培養(yǎng)條件：

*培養(yǎng)基：90%1640+10%胎牛血清

血清我們推薦用:

BOVOGEN 胎牛血清 貨號：SFBS,。

培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%

BALL-1細(xì)胞,，人B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞傳代方法：

1、收到細(xì)胞,，請查看瓶子是否有破裂,，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁,，如有請盡快,。

2、收到細(xì)胞,，如包裝完好,，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過程中的問題,，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時,，請不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，先不要把培養(yǎng)基吸出來。應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,，再于顯微鏡下觀察,，此時多數(shù)細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,，請用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,，如臺盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理

3. 收到細(xì)胞時如無異常情況 ,，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時,，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,。噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作：然后打開蓋子,，先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ML左右,，放在離心管里，然后瓶口過火,，（嚴(yán)禁直接傾倒）,，這樣可以保證不污染，再用10ML的移液管,，將剩余的培養(yǎng)基全部吸出,，放于離心管中，培養(yǎng)瓶中只剩余5-10ML左右培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)就可以了）：超過80%匯合度時,，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng),。

如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液,，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3-5分鐘,，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶,。

4,，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松,。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,，存放于4℃冰箱，以備不時之需,。第二天換液時,，要配制新鮮的培養(yǎng)基和進(jìn)口胎牛血清。這樣對細(xì)胞生長更好,。不要再用我們原瓶的培養(yǎng)基了,。

5 、24小時后，細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,，就可以傳代了,。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長面為準(zhǔn)）PBS或Hanks’液洗滌后棄去,。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的胰酶消化,，消化時間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般1-3分鐘,，不超過5分鐘,。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化,。輕輕晃動瓶壁,，見細(xì)胞脫落下來，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化,。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,，1000rpm/5min,。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),，一般一傳二,，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過稀,，有些生長較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁,，直接將溶液吸入離心管離心即可,。

6，貼壁細(xì)胞 ,，懸浮細(xì)胞,。嚴(yán)格無菌操作。換液時,，換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液和進(jìn)口胎牛血清,，37度    5%CO2 培養(yǎng)

7.  收到細(xì)胞后，請鏡下觀察細(xì)胞,，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞,。若懸浮的細(xì)胞較多，請離心收集細(xì)胞,，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中,。棄掉原液,，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,，若細(xì)胞不多時 血清濃度可以加到15％去培養(yǎng),。若細(xì)胞迏到80%左右 ，血清濃度還是在10％,。

BALL-1細(xì)胞,，人B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞凍存方法:

凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO

儲存：液氮儲存