【產品名稱】IMCD3細胞【另用名稱】mIMCD-3細胞,小鼠腎臟內髓集合管3上皮細胞【來源】美國ATCC【代號】ATCC? CRL-2123?【代數】第四代【運送方式】聯邦或順豐快遞【周期】凍存:3-4天,;復蘇周期:十個工作日【特惠價格】1600元
IMCD3細胞,,復蘇細胞注意事項:1. 收到細胞后當天換液,全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基,,放進培養(yǎng)箱,,第二天再消化。2.邊觀察邊消化,,根據細胞的形態(tài),,終止消化時間,采取以半分鐘間隔吹打細胞邊緣,,如可吹打下來,,即終止消化,。客戶摸索*消化時間,。3.隨細胞有一份細胞操作說明書,,請客戶仔細查看。4.記得加1%雙抗,,降低被污染的概率。另外盡早凍存留種,,以備后用,。5. 售后時間為一周,僅限于細胞本身的質量問題,,而因乙方自己不當操作(不規(guī)范操作,,消化過度,不加雙抗導致的污染等)導致的細胞問題不在售后范疇,。6.收到細胞后,,如細胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問題,,煩請當天盡快,,以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據,,請您務必重視,。7.剛收到細胞時,胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天,,利于細胞盡快恢復狀態(tài),,細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,再調回10%即可,。
IMCD3細胞,,常見的污染如下:1、細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,,根據感染細菌的不同,,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,,對細胞生長影響明顯,。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,,壓力足夠,!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,,一定要注意,!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現象,!可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理2、霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,,倒置顯微鏡下無雜質,,37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,,但出現絮狀雜質,,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,,細胞仍可生長,,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,,用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內,,再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染,。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉移,,采用過氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,,箱壁)。并把過氧乙酸放置在孵箱內一個小時,,使其蒸汽彌漫,。待過氧乙酸的氣味消散后,再移入細胞,。孵箱應定期清潔(2月左右),,尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照,。預防霉菌污染,,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗;但細胞一旦污染,,很難挽救,,制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,。,,將環(huán)境*消毒,如果所有細胞都污染,,可能是系統(tǒng)污染,,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,,可能是操作問題,,就要注意操作 3,、支原體:黑色的,好象多為多形,,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,,而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一,。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,,細胞病變不很明顯,,只是慢慢死去。用泰樂菌素,,獸用支原體病的藥,但可用于細胞培養(yǎng),,無任何不良反應,。Sigma公司的使用時用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度,。4,、黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,,低倍下為黑色點狀,,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養(yǎng)液也是不渾的,,一般不會太影響,,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好,,且觀測到的運動物無明顯增多,,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,,可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現類似現象,。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,,除更換血清外無須特殊處理,。建議如果細胞有可能是此種污染的話,可以增加細胞的種板密度,,以提高細胞的生存率,。5、真菌:一般培養(yǎng)液清亮,,不變色,,鏡下有絲狀物,,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,,象珊瑚狀,,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物,。真菌生長的比較慢,,不象細菌那么容易被發(fā)現,但是一旦發(fā)現有它的存在細胞就被污染了,,也很難救活了,。6、原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,,顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多,,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,,而且細胞狀態(tài)不好,,邊緣不清楚,細胞不透亮,。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng),。這種共生是非常普遍的,但他們的數量小,,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,,只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長,zui終形成惡性循環(huán),。