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VSMC細(xì)胞(大鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞)

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更新時間:2024-08-10 21:01:41瀏覽次數(shù):2230

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VSMC細(xì)胞(大鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞)
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細(xì)胞培養(yǎng)說明

  1. 拿到細(xì)胞后,,先用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶外部,,再在顯微鏡下觀察,看細(xì)胞是否懸浮,,如果懸浮,,吸出培養(yǎng)基,放入離心管,,離心,,倒掉上層培養(yǎng)基,加入5ml 新的DMEM 高糖培養(yǎng)基(+10%FBS),,重懸,,放入培養(yǎng)瓶,再放進37℃,,5%CO2 的培養(yǎng)箱中,。
  2. 如果細(xì)胞正常貼壁,先吸出一部分培養(yǎng)基,,放入溫箱中穩(wěn)定一段時間,,再根據(jù)細(xì)胞生長狀況和實驗需要進行處理。           傳代:先倒掉舊的培養(yǎng)基,然后用D-hank’s緩沖液洗兩遍,,再加1ml 0.25%的胰蛋白酶消化液,,在顯微鏡下觀察,等到細(xì)胞*脫落下來,,加5ml新的培養(yǎng)基終止消化,,用移液管吹散,根據(jù)細(xì)胞量在細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)留下一部分細(xì)胞,,其他吸出去,,然后在培養(yǎng)瓶內(nèi)加滿5ml培養(yǎng)基。再放到37℃,,5%CO2 的培養(yǎng)箱中,。

換液:用D-hank’s緩沖液洗一遍,再加入新的5ml培養(yǎng)基,,在放入37℃,,5%CO2 的培養(yǎng)箱中。

注意:上述處理細(xì)胞的步驟都要在潔凈臺里面操作,。


胎牛血清的處理:

沒有滅活的血清中含有補體成分,,需要將血清在60℃條件下滅活30 min。在水浴鍋內(nèi)進行,,滅活的過程中,,要不停的搖晃,是受熱均勻,,防止沉淀析出來,。滅活后的胎牛血清分裝后放置-20℃,分裝的目的是為了防止血清的反復(fù)凍融,。

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