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S180小鼠腹水瘤細(xì)胞

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產(chǎn)品型號(hào):

品       牌:

廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:上海市

更新時(shí)間:2024-08-10 19:45:30瀏覽次數(shù):1290

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S180小鼠腹水瘤細(xì)胞
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S180小鼠腹水瘤細(xì)胞 詳細(xì)描述:

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)特征:上皮細(xì)胞

微生物及支原體檢測(cè):陰性

安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,,并請(qǐng)注意防護(hù),,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后,,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況,。

(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),,嚴(yán)格無菌操作,,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng),。

(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化,。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中,。如果沒有特別說明,,收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。

S180小鼠腹水瘤細(xì)胞 培養(yǎng)的注意事項(xiàng):

玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上,;2)干烤消毒140度2小時(shí)以上,;無菌工作臺(tái)先清洗后用75%酒精擦拭干凈,,紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3小時(shí)以上,;培養(yǎng)基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗(yàn):將血清按10%加入培養(yǎng)基內(nèi),,用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養(yǎng)基5-10ml置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天,肉眼見無渾濁或沉淀等異物,。分裝后置4度保存,;消化液(pH7.8)或其它加入液,應(yīng)用高壓蒸汽滅菌或一次性無菌濾器過濾除菌,,分裝成支置-20度保存,;培養(yǎng)箱應(yīng)先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外線的應(yīng)照射1小時(shí)以上,,如有高溫滅菌的應(yīng)按程序來菌),。至少每月一次。

進(jìn)入操作時(shí)應(yīng)注意先清洗雙手及手腕,,然后用75%酒精擦拭,,操作時(shí)注意無菌臺(tái)內(nèi)空間層次。手及物品不要在暴露的瓶口上方來往,,如果數(shù)量較多,,培養(yǎng)瓶應(yīng)放在與酒精燈平行地方便于操作,瓶與瓶之間應(yīng)相隔一定的距離,,開瓶(蓋)時(shí)應(yīng)先用75%酒精反復(fù)擦拭或用燈燒,,打開后應(yīng)用燈先燒口,然后燒蓋,。用完后同樣操作,。整個(gè)操作過程盡量在無菌臺(tái)靠里面一點(diǎn)。


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