細(xì)胞名稱：Walker-256細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞

生長特性：懸浮生長

培養(yǎng)條件：RPMI1640+0.11g/L L-Glutamine +0.11g/L 丙酮酸鈉+5.6 MMOL/L 葡

萄糖+ 50umol/L 2 –mercaptoethanol + 10%FBS

傳代比例：1:3-1:6

培養(yǎng)環(huán)境：37℃,，5%CO2,95%O2

售后：收到細(xì)胞后，請先檢查產(chǎn)品是否完整,。如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題立即拍照（如污染,、死亡、快遞運(yùn)輸?shù)仍颍?，請出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真或致銷售熱人員,，我們將盡快為您解決。

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Walker-256細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞 小知識：

細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結(jié)如下:
常見的污染如下：
1,、細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形,，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,，對細(xì)胞生長影響明顯。
仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,，是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠,，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象,！
可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理

2,、霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì),，37度孵箱培養(yǎng)2-3天,，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),，鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,，可看到明顯的菌絲，細(xì)胞仍可生長,，但時(shí)間長之后,，細(xì)胞的活力狀態(tài)變差，
用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅,。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染,。
CO2孵箱被霉菌污染后,，可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移，采用過氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板,，箱壁）,。并把過氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí)，使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后,，再移入細(xì)胞,。孵箱應(yīng)定期清潔（2月左右），尤其在多雨的季節(jié),。
其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照,。
預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗,；但細(xì)胞一旦污染,，很難挽救，制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補(bǔ),，建議舍棄該污染細(xì)胞,。，將環(huán)境*消毒,，如果所有細(xì)胞都污染,，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材,，如果只是個(gè)別污染,，可能是操作問題，就要注意操作 

3,、支原體：黑色的,，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,，原體感染,，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一,。而且它不能用過濾的辦法除去,。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯,，只是慢慢死去,。
用泰樂菌素，獸用支原體病的藥,，但可用于細(xì)胞培養(yǎng),，無任何不良反應(yīng)。Sigma公司的使用時(shí)用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染,。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。

4,、黑蛟蟲：可以穿透濾膜,，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點(diǎn)狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,，培養(yǎng)液也是不渾的,，一般不會太影響，細(xì)胞還是可以用的,。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好,，且觀測到的運(yùn)動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色,、透明度無明顯變化,，可在同一批號的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細(xì)胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,，在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失,，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話,，可以增加細(xì)胞的種板密度,，以提高細(xì)胞的生存率。

5,、真菌：一般培養(yǎng)液清亮,，不變色，鏡下有絲狀物,，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片,，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀,，不象細(xì)胞碎片分不清,，慢慢的會長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了,。

6,、原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多,，輕微活動,，細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好,，邊緣不清楚,，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會與細(xì)胞爭奪營養(yǎng),。這種共生是非常普遍的,，但他們的數(shù)量小,，細(xì)胞站優(yōu)勢所以不會影響到細(xì)胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會影響到細(xì)胞的生長,，zui終形成惡性循環(huán),。

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