CNE1-lmpl( 轉(zhuǎn)lmpl基因鼻咽癌細胞)詳細描述:
CNE1-lmpl( 轉(zhuǎn)lmpl基因鼻咽癌細胞)培養(yǎng)細胞的常規(guī)觀察:
細胞接種或傳代以后,實驗者每天或至多間隔1~2d,,要對細胞做常規(guī)性檢查,。觀察細胞形態(tài)和生長情況以及培養(yǎng)的pH變化、有無污染等,。根據(jù)細胞動態(tài)變化,,做換液或傳代處理,如發(fā)現(xiàn)異常情況應(yīng)及時采取措施,。
檢測原理:
細胞發(fā)生凋亡或壞死,,其細胞DNA均發(fā)生斷裂,細胞內(nèi)小分子量片斷增加,,高分子DNA減少,,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA片斷。但凋亡細胞DNA斷裂點均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間,,出現(xiàn)180-200bp片斷,,而壞死細胞的DNA斷裂點為無特征的雜亂片斷,利用此特征可以確定群體細胞的死亡,,并可與壞死細胞區(qū)別,。
檢測步驟:
1.將凋亡細胞裂解后高速離心,其上清液中含有核小體
2.在微定量板上吸附組蛋白體
3.加上清夜使抗組蛋白抗體與核小體上的組蛋白結(jié)合
4.加辣過氧化物酶標記的抗DNA抗體使之與核小體上的DNA結(jié)合
5.加酶的底物,,測光吸收制
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