超低IgG胎牛血清：通過親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白，

使FBS γ球蛋白含量減到zui低,，一般IgG≤5ug/ml生物學活性不變,。

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一、血清分類：

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二、血清作用

牛血清是細胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,，具有極為重要的功能。

1. 提供能促使細胞指數(shù)生長的激素,、基礎培養(yǎng)基中沒有或含量微小的營養(yǎng)物,，以及某些低分子營養(yǎng)物質；
2. 提供結合蛋白,，識別維生素,、脂類,、金屬離子，并與有毒金屬和熱源物質結合,，起解毒作用,；
3. 是細胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源,；
4. 起酸堿度緩沖液作用,；
5. 提供蛋白酶抑制劑，細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,，保護細胞不受損傷,。

三、血清保存注意事項：

(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.

(2)熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量.補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化.

(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現(xiàn)沉淀.

(4)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內一起過濾,切勿直接過濾血清.

(5)血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清.

(6)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破會而影響血清質量.

四,、血清常見問題：

保存血清的方法血清應保存在-5C至-2OC,。然而，若存放于4C時,，請勿超過一個月,。若您一次無法用完一瓶，建議將無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?，再放回冷凍?

如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質量受損,？

將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8C冰箱使之溶解,，然后在室溫下使之全溶,。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻,。

如何避免沉淀物的產(chǎn)生

（1）解凍血清時,，請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4,。C至室溫),，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C至37,。C),，實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

（2）解凍血清時,，請隨時將之搖晃均勻,，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生

（3）請勿將血清置于37,。C太久,。若在37。C放置太久,，血清會變得混濁,，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,，而影響血清的質量。

（4）血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,，若非必要,，可以無須做此步驟。

（5）若必須做血清的熱滅活,，請遵守56,。C，30分鐘的原則,，并且隨時搖晃均勻,。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻,，都會造成沉淀物的增多,。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?　欲去除這些絮狀沉淀物,，可以將血清分裝至無菌離心管內,，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾,。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,，因為它可能會阻塞過濾膜。

何謂熱滅活?

一般是以56C,，30分鐘來處理已解凍的血清,，因為此加熱步驟，可以使補體去活化,，而補體所參與的反應有:溶細胞活性,，平滑肌的收縮，肥大細胞和血小板組胺的釋放,，增強吞噬作用,，淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活,。

有必要做熱滅活嗎?

實驗顯示,，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用,，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,，而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,，沉淀物的形成會顯著的增多,，這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,，像是 "小黑點"，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,，而把血清放在37C環(huán)境中,，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增,。

因此我們建議您,，若非必須，您可以不需要做熱處理這一步,。如此一來,，不但節(jié)省您寶貴的時間，更確保您血清的質量!另外,，購買已滅活成品也不失一個捷徑,，請在購買的時候注意詢問廠家是否是已滅活血清。