慧穎生物專業(yè)供應(yīng)低價格大鼠環(huán)氧合酶-2（COX-2）ELISA試劑盒,，目的是用于測定大鼠血清，細胞上清及相關(guān)液體樣本中環(huán)氧合酶-2（COX-2）的含量,。質(zhì)量穩(wěn)定,，重復(fù)性好，慧穎生物供應(yīng)的低價格大鼠環(huán)氧合酶-2（COX-2）ELISA試劑盒已被國內(nèi)500家大的科研單位所認可和肯定,。

英文名稱：Rat cyclooxygenase-2 （COX-2） ELISA Kit

規(guī)格：96T

檢測范圍：15 pg/ml– 900 pg/ml 

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上

2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和15%

保存溫度：-20度（長期未使用）,；4°C（三個月內(nèi)使用）

有效期：6個月

價格：

低價格大鼠環(huán)氧合酶-2（COX-2）ELISA試劑盒 說明書：

實驗原理：

   本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠環(huán)氧合酶-2（COX-2）水平。用純化的抗-COX-2抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入大鼠環(huán)氧合酶-2（COX-2），再與HRP標(biāo)記的羊抗大鼠抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的環(huán)氧合酶-2（COX-2）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標(biāo)準曲線計算樣品中大鼠環(huán)氧合酶-2（COX-2）濃度,。

操作步驟：

1.  標(biāo)準品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準品孔10孔，在*,、第二孔中分別加標(biāo)準品100μl,，然后在*、第二孔中加標(biāo)準品稀釋液50μl,，混勻,；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,，再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準品稀釋液50μl，混勻,；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,，再各取50μl分別加到第五、第六孔中,，再在第五,、第六孔中分別加標(biāo)準品稀釋液50ul，混勻,；混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中，再在第七,、第八孔中分別加標(biāo)準品稀釋液50μl,，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,，再在第九第十孔分別加標(biāo)準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。（稀釋后各孔加樣量都為50μl,，濃度分別為900 pg/ml ，600 pg/ml,，300 pg/ml,，150 pg/ml，75 pg/ml）,。

2.  加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。

3.  溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。

4.  配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用,。

5.  洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次,，拍干。

6.  加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外。

7.  溫育：操作同3,。

8.  洗滌：操作同5,。

9.  顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

計算：

以標(biāo)準物的濃度為橫坐標(biāo),，OD值為縱坐標(biāo),，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準曲線查出相應(yīng)的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標(biāo)準物的濃度與OD值計算出標(biāo)準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度,。

低價格大鼠環(huán)氧合酶-2（COX-2）ELISA試劑盒 其它注意事項：

1．  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。

2．  濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果,。

3．  各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。

4．  請每次測定的同時做標(biāo)準曲線,，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準品孔*孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5．  封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。

6．  底物請避光保存。

7．  嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準.

8．  所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．  本試劑不同批號組分不得混用,。