一、Human Casp-3 ELISA Kit的基本信息：

ELISA試劑盒貨號：HTRE6Y

ELISA試劑盒英文名稱：Human Caspase 3 （Casp-3） ELISA Kit

ELISA試劑盒中文名稱：人半胱氨酸蛋白酶3,，Casp-3 ELISA試劑盒Kit

二,、人半胱氨酸蛋白酶3（Casp-3）ELISA試劑盒的基本參數(shù)：

檢測范圍：

靈敏度：

保存溫度：2-8°C避光保存

有效期：6個月

適合樣本：血清、血漿,、組織勻漿,、細胞培養(yǎng)上清液或其它生物相關(guān)液體 serum, plasma, tissue homogenates, cell culture supernates and other biological fluids

三、人,，大鼠半胱氨酸蛋白酶3,，Casp-3 ELISA試劑盒Kit常見問題及解決辦法：

ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全,、花板等結(jié)果,。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā),，提高試驗質(zhì)量,。

下面分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法： 

【1,、選擇試劑】：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘,。

【2,、加樣】：可能原因： 1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣； 2）手工操作中,，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長（特別是室內(nèi)溫度較高時）,； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。解決辦法： 1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后,，再用3000rmp離心15分鐘,；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,，放置一段時間后,，3000rpm離心15分鐘,；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中,，若要貯存,，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2） 加樣后及時放入孵箱,。 3） 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干,。 4） 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑,。 5） 標(biāo)本較多時,，請分批操作。

【3,、孵育】 可能原因： 1） 孵育時未貼封片或加蓋,，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁,，難于清洗*,； 2） 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,，難以清洗*,。解決辦法： 1） 貼封片或加蓋； 2） 按說明步驟嚴格控制操作時間,。 

【4,、洗板】 可能原因： 1） 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 2） 采用半自動洗板機洗板時,，洗液量不足,，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞,，抽吸不*,；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差,。 3） 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長,。 解決辦法： 1） 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通,，洗完板后在吸水紙（選擇干凈,、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 2） 合理安排,，或多用幾臺洗板機,。

【5、 顯色】 可能原因： 1） 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑,； 2） 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流,。解決辦法： 1） 顯色劑盡量在臨用前配制,，堅持不用過期顯色劑,，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用,； 2） 加樣時保持顯色劑不外流； 3） A,、B液應(yīng)避免接觸金屬器械,。 

【6、 終止】 可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,，導(dǎo)致假陽性增加,。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。 

【7,、讀板】 如讀板時板底不清潔等,。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。

所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,，有效提高檢測質(zhì)量,。

在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外,，必須嚴格按照操作步驟進行操作,，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測,、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。 

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