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Exosome是一種可由多種細胞分泌的直徑為30-150nm的膜性小囊泡,。經研究后發(fā)現(xiàn),,exosome其內含有*的蛋白質與核酸分子,exosome所含成份與其細胞來源密切相關,,這也決定了exosome的功能特異性,,如抗原提呈、信號傳導或誘導抗腫瘤免疫反應,、細胞遷移,、細胞分化、細胞間通信,、腫瘤轉移等,。目前,exosome研究已經成為臨床診斷與基礎醫(yī)生的新熱點,。
近年來,,exosome這種小囊泡正得到廣泛的關注。exosome天然存在于體液中,,且攜帶了一些重要的信號分子,,有望在多種疾病的早期診斷中發(fā)揮作用,這使得exosome的市場也在快速擴展,。zui近,,GEN發(fā)布了有關exosome市場的分析報告,對其現(xiàn)狀和前景做了分析,。這份報告由生物技術分析師Enal Razvi撰寫,。
exosome是直徑約為30-150 nm的小囊泡,在30年前被人們所發(fā)現(xiàn),。早期的研究認為,,exosome執(zhí)行蛋白運輸功能,特異靶定受體細胞,,交換蛋白和脂類或引發(fā)下游信號事件,。直到2007年,研究人員發(fā)現(xiàn)exosome也運輸核酸,參與細胞間通訊,。至此,,這種小囊泡才被人重視,并成為熱門的研究對象,。
exosome天然存在于所有體液中,,包括血液、唾液,、尿液和母乳,,且其蛋白、RNA和脂肪成分特異,,因此,,exosome有望在多種疾病的早期診斷中發(fā)揮作用,。今年8月,,美國NIH為24個細胞外(exRNA)通訊方面的研究項目提供1700萬美元的資助,主要關注exRNA作為潛在的生物標志物和療法的臨床實用性,。
具體來說,,exosome的研究方式是分離/捕獲小囊泡,并拷問它所攜帶的貨物,。就目前而言,,人們多采用超速離心、磁珠免疫捕獲,、沉淀或過濾的方法,,對exosome進行前期的分離。之后利用電鏡來分析其大小和形態(tài),,利用流式細胞儀來分析細胞表面標記,,通過Western blot和ELISA等方法對蛋白進行分析,或通過qPCR和新一代測序(NGS)來分析RNA,。
調查發(fā)現(xiàn),,在分離exosome時,約有56%的人采用超速離心法,,說明這種方法仍是目前的金標準方法,。不過,生物通之前也介紹過,,這種方法缺點也不少:耗時耗力,,往往需要8-30個小時;每次zui多只能處理6個樣品,;需要大量的起始材料,;產量不高。商業(yè)化的exosome提取試劑盒已經上市,更為簡單省事,。
在下游分析方面,,36%的研究人員通過Western blot或其他方法來鑒定蛋白,29%的人員利用qPCR對microRNA表達譜進行分析,,9%利用芯片進行microRNA表達譜分析,。同時,新一代測序的用戶也不少,,13%的人員利用NGS開展microRNA/小RNA研究,,9% 開展mRNA研究。
此外,,目前的大部分工作還是停留在科研階段,,后續(xù)的生物標志物開發(fā)和驗證不多,而診斷和療法的開發(fā)就更少,。
Razvi認為,,exosome的定性和定量研究是個快速發(fā)展的市場。同時,,循環(huán)生物標志物的市場也存在著機遇和挑戰(zhàn),。不過,無創(chuàng)產前檢測技術的成功讓人們相信,,循環(huán)生物標志物有望在腫瘤及其他疾病的診斷上發(fā)揮作用,。
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