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1.收到elisa試劑盒后應按標簽說明書儲存,,elisa試劑盒在使用前應于室溫(22-27℃)下充分回溫,,回溫時間為40-60分鐘?;販剡^程中勿將酶標板的包裝袋開封,,回溫結(jié)束后再將其從包裝袋中取出使用。稀稀過后的標準品應丟棄,,不可保存,。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。底物請避光保存,。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻elisa試劑盒里的各種成份及樣品,。
6.樣品稀釋應嚴格按照說明書要求的稀釋倍數(shù)進行稀釋。如稀釋倍數(shù)過大,,可采用多步法進行樣品稀釋,。例如:elisa試劑盒要求樣品需進行500倍稀釋,可吸取5μl樣品加入245μl樣品稀釋液中,,充分混勻后,,再吸取10μl混合液加入90μl樣品稀釋液中即可。
7.稀釋好的樣品在加入酶標板進行孵育的過程中,,盡可能縮短*次加樣和zui后一次加樣的時間間隔,,樣品加好后馬上開始計時。
8.樣品孵育時間結(jié)束后,,馬上甩去孔內(nèi)液體,。如多塊酶標板需同時洗滌,可先將板內(nèi)液體甩去,,倒扣于吸水紙上,,再依次進行洗滌,。使用洗板機洗滌時,建議洗滌次數(shù)增加一次,。未用完的洗滌可4℃-8℃下密封保存1月,。洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
9.底物A應揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值,。試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,加入終止液后立即讀數(shù),。
10.加入試劑的順序應一致,,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。其中移液器應正確使用,、保存、清潔,、校對,。
11.應按elisa試劑盒中說明書標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。如中文與英文說明書有異,,以英文說明書為準。
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