當前位置:上海慧穎生物科技有限公司>>技術文章>>16000-044
上?;鄯f生物提供人源細胞STR鑒定服務,,價格很便宜,800元/株,,量大更優(yōu),,提供具體的實驗報告。除人源細胞(ATCC推薦的11個位點+9個多態(tài)位點)鑒定外,,還提供小鼠品系鑒定(SNP方法)以及小鼠細胞STR分型鑒定(9個STR位點+兩個人源污染位點),。
慧穎生物有10年SNP分型經驗,,已經完成的SNP分型數據近千萬,,采用LDR技術發(fā)表的SCI論文數百篇,并且有3篇發(fā)表于*期刊Nature Genetics上,。具有市場競爭力的價格,!我們公司還有SNP分型服務;STR分型,;分子遺傳學,、分子生物學服務(SNP/STR分型、CNV檢測,、測序,、Real time qPCR、microRNA檢測,、MCF基因表達分析系統(tǒng),、定制PCR array)
在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質雙層的內側,,細胞發(fā)生凋亡早期,,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin V是一種磷脂結合蛋白,,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,,故可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一,。在細胞發(fā)生凋亡時,,膜磷脂酰絲氨酸外翻的發(fā)生早于細胞核的變化,而此時Propidium Iodide(PI)不能通過細胞膜。
細胞壞死時,,雖然也會發(fā)生磷脂酰絲氨酸外翻,,但此時細胞膜的通透性明顯增加,PI等核酸染料進入細胞與細胞核中的核酸結合,,發(fā)出紅色熒光,。所以Annexin V-FITC(綠色熒光)常與鑒定細胞死活的核酸染料(如PI)合并使用,來區(qū)分凋亡細胞與死亡細胞,。
技術原理及步驟
1. 離心收集細胞,,微量離心機轉速1000 rpm,離心時間5 min,,棄培養(yǎng)基,。
2. 用冷PBS洗滌細胞兩次。
3. 用400 μL1× Binding Buffer懸浮細胞,,濃度大約為1×106 cells/mL,。
4. 在細胞懸浮液中加入5 μlLAnnexin V-FITC,輕輕混勻后于2~8°C避光條件下孵育15min,。
5. 加入10 μL PI后輕輕混勻于2~8°C避光條件下孵育5 min,。
6. 在1小時內用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測。
應用實例
應用領域
細胞的早期凋亡及區(qū)分凋亡與壞死細胞
服務周期
我公司在正式接受實驗委托2個星期左右完成實驗并提供實驗報告,。
客戶須知(對材料的要求,、注意事項)
需提供細胞類型,處理條件,。
慧穎生物專業(yè)血清10年,,我們不生產血清,我們只是高品質動物血清的搬運工
血清是一種成分復雜的混合物,,不同批次血清對細胞生長的促進作用不同,。大規(guī)模細胞培養(yǎng)中由血清引起的細胞生長狀態(tài)不佳及病毒滴度的影響表現在以下幾個方面:
1、細胞生長速度緩慢,,長滿單層時間長,;從同一細胞瓶中分出兩瓶細胞,用同一種培養(yǎng)液,,分別加入10%的對照血清和待檢血清,,在相同條件下培養(yǎng)72小時,會出現對照血清長滿單層,,而待檢血清大約只有60~70%,,這種血清就不適合用來大規(guī)模培養(yǎng)細胞。
2,、細胞傳代后形態(tài)不正常,,細胞狀態(tài)發(fā)生變化 ,;由于血清的質量問題,使原本狀態(tài)正常的細胞經傳代后形態(tài)會變差,;比如:細胞瓶里會出現一些蠕動的小黑點(并非污染),,或者細胞表面形成一層油狀覆蓋物;細胞的輪廓變得模糊,,細胞之間的間隙被血清中的蛋白顆粒填充,,從而影響細胞向四周擴展生長。
3,、細胞傳幾代后就出現脫壁現象,,不能連續(xù)傳代 ;質量較差的血清缺乏某種細胞的貼壁因子,,會使細胞在傳代過程中逐漸喪失貼壁的能力,。細胞會從正常的貼壁狀態(tài),邊緣開始萎縮,,上翹,。觀察到的現象就是細胞表面不光滑,晃動細胞瓶會看到細胞表面有絮狀物隨培養(yǎng)液波動,。隨著傳代次數增加,,細胞萎縮的情況越來越嚴重,直到zui終*脫壁而死亡,。
4,、細胞長的很好,,致密的單層,,狀態(tài)也很正常,但是接毒后細胞基本不發(fā)生病變,,做滴度檢測幾乎測不出抗原滴度,。這種情況也許是因為血清中含有與接種的病毒有同源的特異性抗體。比如血清中經常會存在乙腦抗體,,牛腹瀉病毒抗體等,,如果存在這些抗體,就會把接進去的病毒給中和掉,。如果抗體滴度很高,,病毒會被抗體*中和,就沒有病毒顆粒在細胞中增殖,,所以會檢測不到病毒滴度,。這種情況給疫苗企業(yè)造成的損失是相當大的,不產毒等于前面所做的那么多工作全部白費,,浪費人力,、物力,尤其是時間上的浪費,從培養(yǎng)細胞開始到接病毒,,到收液至少需要一兩個月,,一旦出現不產毒的情況,那么這一兩月時間就白白浪費掉了,,這也是牛血清給疫苗企業(yè)造成的風險之一,。
5、細胞生長的狀態(tài)一般,,產毒少,,毒價低。這種情況比較常見,,細胞是病毒的載體,,由于血清質量不好,導致細胞生長狀態(tài)不好,,病毒就無法進行正常的復制,。并非所有病毒都不能復制,所以就造成疫苗的效價不夠,,可能造成不合格產品,。
看來一款血清直接關系細胞的生死存亡,不用擔心,,慧穎提供無支原體,,低內毒素和低血紅素的,無反復凍融的高品質血清
產品名稱 貨號 來源 規(guī)格 市場價格
胎牛血清FBS 10270-106 SOUTH AMERICA 500ML 3200
胎牛血清FBS 10270-106 SOUTH AMERICA 500ML 3200
胎牛血清FBS c2027050 SOUTH AMERICA 500ML 2600
優(yōu)等胎牛血清FBS 10437-028 Mexico 500ML 3200
優(yōu)等胎牛血清FBS 10437-028 Mexico 500ML 3200
優(yōu)等胎牛血清FBS 10437-028 Mexico 500ML 3200
優(yōu)等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000
優(yōu)等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000
優(yōu)等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000
特級胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800
特級胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800
特級胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800
優(yōu)等胎牛血清FBS 26140-079 USA 500ML 3600
優(yōu)等胎牛血清FBS 26140-079 USA 500ML 3600
熱滅活胎牛血清FBS heat inactivated 10082-147 USA 500ML 5600
熱滅活胎牛血清FBS heat inactivated 10100-147 AUSTRALIA 500ML 14239
熱滅活胎牛血清FBS heat inactivated 10100-147 AUSTRALIA 500ML 14239
超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS 16250-078 USA 500ML 6000
透析胎牛血清Dialyzed FBS 264000-044 USA 500ML 6800
活性炭/葡聚糖處理胎牛血清Charcoal Stripped FBS 12676-029 USA 500Ml 6800
新生牛血清New born calf serum 16010159 New Zealand 500ML 1035
馬血清Horse Serum 16050-122 New Zealand 500ML 909
熱滅活馬血清Heat-Inactivated Horse Serum 26050-088 New Zealand 500Ml 1069
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,,化工儀器網對此不承擔任何保證責任,。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。