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上海慧穎生物科技有限公司

SK-OV-3【卵巢癌細胞】細胞傳代

時間:2016-2-17閱讀:2579

SK-OV-3【卵巢癌細胞】細胞傳代

細胞介紹:SK-OV-3細胞為人卵巢癌細胞,來源于人卵巢癌,,中文名為人卵巢癌細胞,,正常的細胞形態(tài)為上皮樣,貼壁生長,。SK-OV-3由G.Trempe和L.J.Old在1973年從卵巢腫瘤病人的腹水分離得到,。 此細胞對腫瘤壞死因子和幾種細胞毒性藥物包括白喉毒素、順鉑和阿霉素均耐受,。 在裸鼠中致瘤,,且形成與卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。 在本庫通過支原體檢測,。

細胞名稱:SK-OV-3【卵巢癌細胞】

來源:人卵巢腺癌

培養(yǎng)基:RPMI-1640 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2

消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA溶液,消化5-10min

傳化比例:1:2-1:6

換液時間:3-4天換液一次

凍存液比例:85%培養(yǎng)基,,10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度:1-3 ×10^6/管,,液氮保存

SK-OV-3【卵巢癌細胞】貼壁細胞:對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>

SK-OV-3【卵巢癌細胞】懸浮細胞:一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。

 

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SK-OV-3【卵巢癌細胞】培養(yǎng)用液pH對細胞生長的影響:

由于大多數(shù)細胞適宜pH為7.2~7.4,,偏離此范圍對細胞將產(chǎn)生不良的影響,。各種細胞對pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細胞一般對pH變動耐受差,,無限細胞系耐受力強,。

但總體來說,細胞耐酸性比耐堿性強一些,,偏酸環(huán)境中更利于細胞生長,。因此,我們在配制培養(yǎng)用液時,,可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些,。培養(yǎng)基在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時,溶液的pH還會向上浮動0.2左右,。

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