細胞名稱

草魚腎細胞,； GIK

種屬

草魚

生長狀態(tài)

貼壁生長

培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基類型：RPMI 1640培養(yǎng)基

FBS（Gibco16000044）: 10%

抗生素：雙抗

培養(yǎng)條件：37℃,，CO2: 5%

傳代方法

收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)：

如果沒長滿,，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng),。

如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng),。

貼壁細胞傳代方法：

1 棄去培養(yǎng)基，用不含鈣,、鎂離子的PBS洗1-2次,。

2 加1ml 0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與大部分細胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內,，隨時觀察細胞狀態(tài)變化,，待細胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代,。

1 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后,，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液后,，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),。

2離心法傳代是將細胞連同培養(yǎng)液一并轉移到離心管內， 1000rpm,，5分鐘,，去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內,，吹打細胞形成細胞懸液后,，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

 一般沒有特殊說明,，細胞一般是一傳二,。

凍存方法

70% *培養(yǎng)基，20%FBS,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

儲存：液氮中長期保存,。

注

1 觀察細胞在低倍鏡下觀察,，便于整體估計細胞密度。

2 在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落,，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng),。

3 收到細胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、細胞污染等，請拍照并在三天內與我們,。