日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

上?;鄯f生物科技有限公司

家兔BMSC分離培養(yǎng)步驟

時(shí)間:2014-12-19閱讀:2130

家兔BMSC分離培養(yǎng)步驟 

1. 麻醉,、備皮、消毒,、鋪巾:取14-5周齡新西蘭幼兔,,速眠新肌肉注 (0102mLkg)麻醉。仰臥固定于操作臺(tái)上,,褪毛,,備皮,,2%碘酒、75%酒精(或碘伏)常規(guī)消毒,,鋪洞巾(洞巾孔洞應(yīng)控制在lcm左右,,以利于減少污染) 

 

2. 在雙側(cè)踝關(guān)節(jié)處環(huán)形剪開(kāi)皮膚,,再縱行剪開(kāi)皮膚至骶尾部,,分離肌肉、 筋膜等軟組織至見(jiàn)骨膜,,電鋸離斷踝關(guān)節(jié),、膝關(guān)節(jié)及髖關(guān)節(jié),獲取家兔股骨和脛骨(橈骨),置于裝有PBS液的無(wú)菌盒內(nèi),。(亦可從髂前上棘穿刺抽取骨髓) 

 

3.用PBS液體清洗骨組織3-4遍,,去除雜物、血跡后,,在超凈工作臺(tái)上,, 無(wú)菌條件下剝離骨周?chē)募∪廛浗M織,用眼科剪從股骨和脛骨的干骺端打開(kāi)骨髓腔,,用含有適量肝素( 625 U/mL)DMEM 液沖洗骨髓腔,,收集沖洗液約 6 8 mL。吸管反復(fù)吹打后,,1 500 r/min,,離心5 min,棄上清,。加入 DMEM 培養(yǎng)基重懸,,將上述細(xì)胞重懸液按照 1 1 的比例緩慢滴加到密度為 1. 073 g/mL PercoⅡ分離液中,1 500 r / min 離心 20 min,。離心后管內(nèi)容物分為 3 層,,收集中間乳白色云霧狀的單個(gè)核細(xì)胞層,加入 DMEM 培養(yǎng)液稀釋混勻,,1 500 r/min 離心 5 min,,洗滌 2 3 次,去除多余的脂肪細(xì)胞及組織液,。用含雙抗的 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,,以 2. 0 × 10^5個(gè)/cm2的細(xì)胞密度接種于25cm^2培養(yǎng)瓶中,置于 37 ℃,,5%,、飽和濕度的孵箱中培養(yǎng)。

 

4. 48小時(shí)后半量換液,,去除浮物及其它非貼壁細(xì)胞(如造血干細(xì)胞),,后每隔3天換液一次,。 

 

5. 7-10天后,待細(xì)胞融合長(zhǎng)滿(mǎn)至80%以上時(shí)用0.25%胰蛋白酶消化傳代,。 經(jīng)過(guò)*次傳代后,,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞大約能占60%左右,并且呈漩渦狀生長(zhǎng),;一般經(jīng)過(guò)3次左右傳代后,,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞大約能占90%左右,。

會(huì)員登錄

X

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功,!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性,、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),,化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。

溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買(mǎi)風(fēng)險(xiǎn),,建議您在購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量,。

撥打電話(huà)
在線(xiàn)留言