有經驗和剛剛從事細胞培養(yǎng)工作的人員都應該認真仔細地詢問下細胞提供方提供的建議，提前了解所要培養(yǎng)細胞的詳細資料,，準備好細胞所要用到的培養(yǎng)基和相關試劑,，雖然所有的貼壁，半貼壁或者懸浮細胞處理方式差不多,，但是不同的實驗室培養(yǎng)條件和處理力度還有試劑的批間差這些問題存在,，也會導致對細胞處理不當，或者環(huán)境的不適應而造成細胞的死亡,。

　　1.收到細胞,，*時間要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好,，觀察細胞密度,，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。由于運輸的時間或者溫度的變化,，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣,，主要是貼壁牢固問題。比如293T,，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,，會發(fā)生大片的脫落,，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的,，通過離心收集,，加以胰酶的消化，重新打散,，又可以正常的貼壁生長,。

　　2.當通過上一步的觀察，細胞初步沒有任何問題時,，進行下一步操作,。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察,。細胞在低于正常生長溫度情況下,，會調整為靜止期,，或者慢速生長期，必須恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右,，才能重新調整到接近對數生長期的狀態(tài),，在對數生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率,。

　　3.如果經*步觀察發(fā)現細胞密度超過90%,，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代,。傳代的比例應依據不同的細胞而定,。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定,，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型,，一次少傳些,，保證每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長,。至于一些比較陌生的細胞,，*次處理也可以依照第二種情況。