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Cegrogen胎牛血清A0500-3011(低內(nèi)毒素)使用細(xì)節(jié)

時(shí)間:2024-5-8閱讀:840

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Cegrogen胎牛血清A0500-3011(低內(nèi)毒素)使用細(xì)節(jié)

1.血清解凍

 

建議將血清從冰箱先移至2-8℃冰箱解凍,,不宜在較高溫度下進(jìn)行解凍,解凍溫度較高會導(dǎo)致血清渾濁,、沉淀增加,、品質(zhì)下降等問題。解凍過程中需要輕輕搖晃混合,,嚴(yán)禁將血清直接放在37℃長時(shí)時(shí)間孵育解凍,。

 

如您是儲存在-80℃的血清,需提前幾天轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中(至少24小時(shí)),,使用前轉(zhuǎn)移至4℃冰箱中緩慢融化,,融化過程中需不定期多次緩慢輕柔搖動瓶身使血清混勻,搖晃過程中避免劇烈搖晃產(chǎn)生泡沫,。

2.血清濃度

原則上血清添加量不要太多,,通常分為5%、10%,、20%幾檔,,部分細(xì)胞原代提取時(shí)會使用20%血清,大部分細(xì)胞正常培養(yǎng)時(shí)會使用10%的血清濃度,。至于某一株細(xì)胞適應(yīng)什么樣的血清濃度,,還需要根據(jù)細(xì)胞特性,、實(shí)驗(yàn)?zāi)康淖鰷y試和調(diào)校。

3.血清熱滅活

血清熱滅活是為了去除補(bǔ)體,,補(bǔ)體是免疫系統(tǒng)的一部分,,在體內(nèi)可通過多條途徑被激活,從而發(fā)揮調(diào)理吞噬裂解細(xì)胞,、介導(dǎo)炎癥,、免疫調(diào)節(jié)和清除免疫復(fù)合物等多種作用。如果不涉及以上實(shí)驗(yàn),,可以不進(jìn)行血清熱滅活,。

4.血清試用:

血清開始進(jìn)行試用時(shí),如果是重新復(fù)蘇細(xì)胞,,建議用原培養(yǎng)體系進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇,,待細(xì)胞狀態(tài)進(jìn)入狀態(tài)后再進(jìn)行測試。測試時(shí)不建議直接100%直接換成新血清體系進(jìn)行培養(yǎng),,而應(yīng)該按照比例進(jìn)行梯度替換(例如,,換液按照新舊體系1:3,第二次換液1:1,,第三次換液3:1,,而后替換。對于一些對培養(yǎng)體系比較敏感的細(xì)胞,,可以進(jìn)一步優(yōu)化替換比例,。)通過這種方法可以避免細(xì)胞因環(huán)境改變而出現(xiàn)應(yīng)激或者異常造成不必要的損失。

 

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