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GM17940細(xì)胞,,人骨骼肌成肌細(xì)胞
組成部分:細(xì)胞 T25瓶 細(xì)胞數(shù)量1-3百萬級別+說明書
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基:90% DMEM培養(yǎng)基+10% 特級胎牛血清
氣相:空氣95%,,二氧化碳5%
溫度:37℃
GM17940細(xì)胞,人骨骼肌成肌細(xì)胞 操作步驟:
1.用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒,,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行2-3小時(shí)的緩沖,,.然后置于無菌操作臺(tái),打開瓶口,,將其中的培養(yǎng)液去掉,,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進(jìn)行換液以及傳代,;
2.待細(xì)胞長滿瓶底面積80%-90%,,需要對其進(jìn)行傳代,第一次傳代比例為1:2,。
3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預(yù)熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS,,輕晃洗滌后棄去,。往瓶中加1ml預(yù)熱好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察,,以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓,、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為消化時(shí)間,記錄消化時(shí)間,,以便于下次消化),,消化好后加入1ml培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,,使之脫落,,然后收集細(xì)胞懸液,1200rpm離心3min,,棄上清,,加入培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,進(jìn)行傳代,。
注意事項(xiàng):
1 收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞,、漏液、渾濁等現(xiàn)象,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系,。
2 瓶中運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用,請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)
3 對于貼壁細(xì)胞,,若大部分細(xì)胞漂浮,,置于培養(yǎng)箱隔夜觀察,大部分漂浮細(xì)胞重新貼壁,,表明細(xì)胞活力正常,,繼續(xù)培養(yǎng),剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,;若大部分細(xì)胞仍然不貼壁,,將漂浮的細(xì)胞離心收集,用臺(tái)盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力,,并與本公司銷售人員及時(shí)聯(lián)系,。
4 建議客戶收到細(xì)胞后不同倍鏡各拍幾張細(xì)胞的照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),,如細(xì)胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于72h內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,,以便于更好的幫您解決問題,超過時(shí)間我段,,本公司則默認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好,,不免費(fèi)對后續(xù)細(xì)胞狀態(tài)問題進(jìn)行售后。
5 因細(xì)胞產(chǎn)品的特殊性,,如客戶對本公司細(xì)胞質(zhì)量存有疑問,,請于收到細(xì)胞后兩個(gè)月內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,,超過時(shí)間段,本公司則默認(rèn)細(xì)胞質(zhì)量優(yōu)良,,不承擔(dān)因細(xì)胞產(chǎn)生的任何責(zé)任,。
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