Gibco胎牛血清10270-106

Question如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損,？

將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解,，然后在室溫下使之全融,。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻,。

長時間儲存在2-8℃時,，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原,、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁,。因此，推薦在-20℃以下儲存血清,，并避免反復(fù)凍融,。

我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時,，請勿超過一個月,。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),，再放回冷凍,。

Question血清中包含沉淀物，它們是什么,，怎么處理?

沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白,。這是正常特性，不會影響產(chǎn)品性質(zhì),。要除去沉淀,，離心血清(400g,，1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解,。所以,，使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃，沉淀會自然消失,。

Question如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?

按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：

(1)解凍血清時,，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一,，減少沉淀的發(fā)生,。

(2) 血清分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),，使溫度與成分均一,。

(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大,，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。

(4) 勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁,，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,，從而影響血清的品質(zhì)。

(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,，若非必要,，可以無須做此步驟。

(6) 若必須做血清的熱滅活,，請遵守56℃,，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多,。

Question 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,，可長期保存嗎?

一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它,。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解,。

Question為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件,，刺激平滑肌收縮,，細胞和血小板釋放組胺,，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué)研究,，培養(yǎng)ES細胞,、平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清,。

Question有必要做熱滅活嗎?

實驗顯示,，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,，而造成細胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多,，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,，像是“小黑點”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,，而把血清放在37℃環(huán)境中,，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增,。

若非必須,，可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間,，更確保血清的質(zhì)量!

Question細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理,？

一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先,，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),，黑點是否游動,。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖,，培養(yǎng)基就會迅速變黃,、變混濁。污染包括細菌污染,、支原體污染等,。

如果在鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比,，沒有任何變化,，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：

(1)細胞生長過老,，破碎的細胞殘骸;

(2)血清質(zhì)量不好,，反復(fù)凍融的結(jié)果;

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細胞生長;

(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì),、容器不合格,?？蓱?yīng)用離心,、過濾的方法去除這些黑點;

(5)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點，可能是原代組織中的雜質(zhì),，多次傳代可以消除,。