RPMI8226細(xì)胞| RPMI8226細(xì)胞系培養(yǎng)步驟

時(shí)間：2020-8-27閱讀：1787

RPMI8226細(xì)胞| RPMI8226細(xì)胞系培養(yǎng)步驟

產(chǎn)品名稱：RPMI8226細(xì)胞

中文名稱：人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞,；RPMI8226

規(guī)格：T25

供應(yīng)商：上海慧穎生物科技有限公司

復(fù)蘇周期：10個(gè)工作日左右

培養(yǎng)步驟：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1,、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，*脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞,，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi),，嚴(yán)格無菌操作,；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%,，換液繼續(xù)培養(yǎng),，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）,。

2、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,，凍存比例為90%FBS+10%DMSO,。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后,，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi),，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,，加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng),，視情況傳代或者凍存,。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）,。

慧穎生物是一家專業(yè)從事細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品的公司,，擁有獨(dú)立細(xì)胞房（可隨時(shí)約定參觀），供應(yīng)胎牛血清,，無血清細(xì)胞凍存液,，無血清培養(yǎng)基,，常規(guī)培養(yǎng)基，胰酶,，雙抗,，*培養(yǎng)基,，STR鑒定細(xì)胞,，感受態(tài)細(xì)胞等，專業(yè),，專注,，性價(jià)比高，是您Shou選之家,。

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綿羊肺成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞	OAR-L1	原代細(xì)胞永生化
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人肺癌細(xì)胞紅色標(biāo)記	A549-RFP	細(xì)胞系
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人結(jié)直腸癌氟尿嘧啶耐藥株	HCT-15/FU	細(xì)胞系耐藥株
人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞	U251MG/TMZ-luc	細(xì)胞系
人類星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞	U251MG/TMZ	構(gòu)建耐藥株
人慢性骨髓性白血病細(xì)胞阿霉素	K562/ADR	細(xì)胞系耐藥株
人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤紅色標(biāo)記	U-87MG-RFP	細(xì)胞系
人皮膚成纖維細(xì)胞	HSF	原代細(xì)胞永生化
人臍靜脈內(nèi)皮綠色GFP標(biāo)記	原代細(xì)胞-GFP	原代細(xì)胞
人臍靜脈內(nèi)皮紅色RFP標(biāo)記	HUVEC-RFP	細(xì)胞系
人臍靜脈內(nèi)皮綠色GFP標(biāo)記	HUVEC-GFP	細(xì)胞系
人臍靜脈內(nèi)皮	HUV-EC-C	細(xì)胞系
人前庭鞘膜瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
人乳腺癌阿霉素耐藥細(xì)胞株	Mcf-7/adr	細(xì)胞系耐藥株
人乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記	MCF7-luc	細(xì)胞系
人三陰性乳腺癌	MDA-MB-231-luciferase	細(xì)胞系
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞	SH-SY5Y 轉(zhuǎn)染突變型	細(xì)胞系
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞	SH-SY5Y 轉(zhuǎn)染野生型	細(xì)胞系
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