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人眼結膜上皮細胞體外培養(yǎng)和細胞保存的佳方法,,建立人結膜上皮細胞系,進一步研究人結膜的病理,、生理特點及為毒理試驗提供可靠的細胞模型,。
方法:分別用組織塊培養(yǎng)法、機械分離法及混合消化液培養(yǎng)法體外培養(yǎng)正常成年人結膜上皮細胞,,通過觀察細胞形態(tài),、生長特性并用原位免疫組化方法鑒定培養(yǎng)細胞;收集第3代和第4代融合的細胞液氮罐凍存,保存30天后復蘇,,觀察復蘇成功率,。
這3種取材方法中,混合消化液培養(yǎng)法細胞生長繁殖較快,,培養(yǎng)細胞形態(tài)多樣,,貼壁生長。免疫組化染色陽性,,細胞凍存復蘇的成功率均達到90%,。組織塊培養(yǎng)法細胞生長比較緩慢,,而機械分離法細胞未見貼壁生長。
混合消化液培養(yǎng)法是人結膜上皮細胞培養(yǎng)的佳方法,,通過液氮罐凍存可保存培養(yǎng)的人結膜上皮細胞,。
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