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PBMNC分離效果
按照GMP生產規(guī)范和臨床ACI要求分離外周血PBMNC,，冷凍保存前細胞活性為99.6%±0.4%（n=5），與原始血樣比，PBMNC回收率58.4%±6.52%（n=5）。
細菌和真菌培養(yǎng)陰性，實現全程無菌處理,。
不同冷凍保護液對PBMNC的保護效果不同
PBMNC在－196℃液氮中儲存24個月后復蘇，鏡下觀察見細胞形態(tài)完整,，圓形飽滿,，PBMNC復蘇效率89.7%±3.82%，凍存液中含80%無血清培養(yǎng)基組和含80%自體血漿組比較,，無統(tǒng)計學差異（P≥0.05）（表1）,。
PBMNC凍存后誘導
AIL細胞的體外增殖及表型分析在倒置顯微鏡下觀察顯示，外周血單個核細胞呈懸浮生長,，大小均勻,，折光性一致，AIL經4d培養(yǎng)后部分細胞明顯增大,，可見細胞集落,，胞核密度加強，體積增大,，胞膜光滑,，未見突起，新鮮與凍存后的單個核細胞誘導的AIL在形態(tài)和表型上無明顯差別,，增殖高峰期均在10－12d,。
在培養(yǎng)過程中第14天，凍存組AIL細胞所占相對百分率由約2.3%上升約為10.4%,，細胞數增加約1048倍,，對照組AIL所占相對百分率由約2.3%上升為約11.3%，細胞數增加約1105倍,。兩組之間在細胞增長倍數與AIL所占百分比無顯著差異（P＞0.05）,。
（表1）
效應細胞的體外細胞毒活性
新鮮的與凍存的單個核細胞誘導的AIL對NK敏感（K562）或非敏感株細胞（HeLa）及貼壁或懸浮生長的腫瘤細胞均顯示出很強的殺傷活性，且該活性隨效靶濃度比的增加而增大,，兩組間的細胞毒活性無顯著性差異（P＞0.05）（表2）,。
圖2：比較各種冷凍和對照組之間的增殖和細胞表型,。A：所有表型培養(yǎng)前。B：所有在冷凍組表型培養(yǎng)14 天后,。C：所有對照組表型培養(yǎng)14 天后,，D：所有增殖。E：自體免疫淋巴細胞,。
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