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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X1780 | 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
| 組織來源 | 冠狀動(dòng)脈 | 種屬來源 | 小鼠 |
| 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
詳細(xì)介紹
原代細(xì)胞培養(yǎng)：
原代細(xì)胞（Primary cells）：是指直接從機(jī)體取出的組織或細(xì)胞獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞,。這里的組織主要指：組織器官,、外周血及胚胎等,。
原代細(xì)胞培養(yǎng)：由于原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，繁殖一定的代數(shù)停止生長(zhǎng)（一般10代以內(nèi)）,。所以一般認(rèn)為：培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng),。
公司產(chǎn)品僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
一、細(xì)胞基本屬性 | |
細(xì)胞名稱 | 小鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 |
組織來源 | 冠狀動(dòng)脈 |
商品貨號(hào) | A01X1780 |
種屬來源 | 小鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介 | 小鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞分離自冠狀動(dòng)脈組織,；冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈,，起于主動(dòng)脈根部，分左右兩支,，行于心臟表面,。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型：右優(yōu)勢(shì)型,、均衡型,、左優(yōu)勢(shì)型。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的第一對(duì)分支,。左冠狀動(dòng)脈為一短干,，發(fā)自左主動(dòng)脈竇,，經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后,，立即分為前室間支和旋支,。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合,。它是構(gòu)成冠狀動(dòng)脈壁的主要細(xì)胞成分,，細(xì)胞膜上分布著多種離子通道，如電壓依賴性Na+通道,、多種Ca2+通道和K+通道,；它們參與了靜息電位的維持與細(xì)胞膜電位的復(fù)極化、超極化,，調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,，此外動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、炎癥及凋亡等,。因此,，原代分離培養(yǎng)的冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，對(duì)研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機(jī)制具有非常重要的作用,。冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí),，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。 |
包被條件 | PLL(0.1mg/ml),，明膠(0.1%) |
培養(yǎng)基 | 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
傳代特性 | 可傳3代左右 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
具體步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次,；切成約1mm3組織塊,；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min,；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）,；
4. 消化期間,，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸,，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng),。
注意事項(xiàng)：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請(qǐng)注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和技術(shù)部溝通,。
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