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原代細(xì)胞培養(yǎng)：

原代細(xì)胞（Primary cells）：是指直接從機(jī)體取出的組織或細(xì)胞獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞,。這里的組織主要指：組織器官、外周血及胚胎等,。

原代細(xì)胞培養(yǎng)：由于原代細(xì)胞生長緩慢,，繁殖一定的代數(shù)停止生長（一般10代以內(nèi)）。所以一般認(rèn)為：培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng),。

公司產(chǎn)品僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

具體步驟：

1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織,，無菌PBS清洗3-5次,；切成約1mm3組織塊；

2. 加入2mmol 的 EDTA,，搖勻后放置冰上約 30-60min,；

3. 離心,，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；

4. 消化期間,，置于37°培養(yǎng)箱,。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,，約1-2h,；

5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,，收集,；

6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng),。
注意事項(xiàng)：

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,。

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