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大鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 A01X1535 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
組織來源 冠狀動脈 種屬來源 大鼠
生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
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詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

一,、細(xì)胞基本屬性

細(xì)胞名稱

大鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞

組織來源

冠狀動脈

商品貨號

A01X1535

種屬來源

大鼠

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡介

大鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,,起于主動脈根部,,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,,將冠狀動脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型,、均衡型、左優(yōu)勢型,。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支,。左冠狀動脈為一短干,發(fā)自左主動脈竇,,經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支,。前室間支沿前室間溝下行,,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動脈壁的主要細(xì)胞成分,,細(xì)胞膜上分布著多種離子通道,,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道,;它們參與了靜息電位的維持與細(xì)胞膜電位的復(fù)極化,、超極化,調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,,此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細(xì)胞增殖,、炎癥及凋亡等。因此,,原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細(xì)胞,,對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機(jī)制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,核卵圓形,、居中,;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細(xì)胞密度低時(shí),,常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn),。

包被條件


培養(yǎng)基

FBS、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率

2-3天換液一次

生長特性

貼壁

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

傳代特性

可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)良好

消化液

0.25%胰蛋bai酶

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,,95%;CO2,,5%

 

原代細(xì)胞培養(yǎng):

原代細(xì)胞(Primary cells):是指直接從機(jī)體取出的組織或細(xì)胞獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞,。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等,。

原代細(xì)胞培養(yǎng):由于原代細(xì)胞生長緩慢,,繁殖一定的代數(shù)停止生長(一般10代以內(nèi))。所以一般認(rèn)為:培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng),。

8.jpg

6.jpg



具體步驟:

1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次,;切成約1mm3組織塊,;

2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min,;

3. 離心,,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);

4. 消化期間,,置于37°培養(yǎng)箱,。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,,約1-2h,;

5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,,收集,;

6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng),。

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注意事項(xiàng):

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,,消化時(shí)間不宜過長,,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和技術(shù)部溝通。

 


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