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詳細介紹
具體步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次,；切成約1mm3組織塊,；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心,，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）,；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱,。每15min搖晃一次,，消化時間根據腫瘤組織來定，約1-2h,；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,，用 40μm 的細胞濾網過濾細胞，收集,；
6. 用培養(yǎng)基重懸,，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
一,、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 大鼠胚胎成纖維細胞 |
組織來源 | 胚胎組織 |
商品貨號 | A01X1754 |
種屬來源 | 大鼠 |
產品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
細胞簡介 | 大鼠胚胎成纖維細胞分離自胚胎,；成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來,。成纖維細胞較大,，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,，細胞質嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下,，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起,；6h后細胞基本貼壁wan全,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長,，不聚集成團；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài),，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長,，平坦,、胞體較大，細胞質透明,，細胞核較大,，呈橢圓形，顏色淡,。細胞融合,，并彼此連接成網狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞常用作ES細胞培養(yǎng)常用的飼養(yǎng)層細胞,，能產生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子,，故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性，且分泌效果優(yōu)于外源添加的一些因子,，而且可以為ES細胞的培養(yǎng)提供類似于體內的微環(huán)境,，故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用。 |
包被條件 | |
培養(yǎng)基 | 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
傳代特性 | 可傳5代左右,；3代以內狀態(tài)良好 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通,。
原代細胞培養(yǎng)：
原代細胞（Primary cells）：是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養(yǎng)的細胞,。這里的組織主要指：組織器官,、外周血及胚胎等。
原代細胞培養(yǎng)：由于原代細胞生長緩慢,，繁殖一定的代數停止生長（一般10代以內）,。所以一般認為：培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。
公司產品僅供科研研究實驗
公司正在出售的產品：
豬前脂肪細胞 | 侵蝕侏儒囊菌Nannocystisexedens |
豬內皮細胞 | 弱小珊瑚桿菌Corallococcusexiguous |
豬成骨細胞 | 黃色粘球菌Myxococcusxanthus |
人肺微血管平滑肌 | 蘑菇假單胞菌Pseudomonasagarici |
雞腎小管上皮細胞 | 多黏類芽孢桿菌Paenibacilluspolymyxa |
雞小腸黏膜上皮細胞 | 鞘氨醇單胞菌Sphingomonasazotifigens |
雞氣管上皮細胞 | 斯氏梭菌Clostridiumsticklandii |
雞骨骼肌細胞 | 變異鏈球菌Streptococcusmutans |
雞外周血單核細胞 | 鰒發(fā)光桿菌Photobacteriumleiognathi |
人胰島β細胞 | 菊糖芽孢乳桿菌Sporolactobacillusinulinus |
人甲狀腺濾泡上皮細胞 | 戊糖乳桿菌Lactobacilluspentosus |
人胰腺上皮細胞 | BacillusnovalisBacillusnovalis |
人臍帶血單核細胞 | 大鼠胚胎成纖維細胞BacillusdrentensisBacillusdrentensis |
人外周血白細胞 | BacillusviretiBacillusvireti |
人腸微血管內皮細胞 | 人蒼白桿菌Ochrobactrumanthropi |
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