化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1750 | 主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
| 組織來源 | 視網(wǎng)膜組織 | 種屬來源 | 大鼠 |
| 生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 神經(jīng)元細胞樣 |
詳細介紹
原代細胞培養(yǎng)：
原代細胞（Primary cells）：是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養(yǎng)的細胞,。這里的組織主要指：組織器官、外周血及胚胎等,。
原代細胞培養(yǎng)：由于原代細胞生長緩慢,，繁殖一定的代數(shù)停止生長（一般10代以內(nèi)）。所以一般認為：培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng),。
公司產(chǎn)品僅供科研研究實驗
一,、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 |
組織來源 | 視網(wǎng)膜組織 |
商品貨號 | A01X1750 |
種屬來源 | 大鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
細胞簡介 | 大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,，是一層透明的薄膜,。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開,，稱為視網(wǎng)膜脫離,。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細胞組成,，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光,、散熱以及再生和修復(fù)等作用,。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層,、視錐,、視桿細胞層、外界膜,、外顆粒層,、外叢狀層、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)叢狀層,、神經(jīng)節(jié)細胞層,、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜,。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭,。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成,。第一神經(jīng)元是視細胞層，專司感光,，它包括錐細胞和桿細胞,。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處多,。第二層叫雙節(jié)細胞,，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡(luò)作用,。第三層叫節(jié)細胞層,，專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),，它貼于眼球的后壁部,，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口,。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,，在黃斑區(qū)，其分辨能力強,。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞貼壁后呈單層排列,，部分細胞聚集成團，細胞呈圓形或橢圓形,，核圓且相對透明,，有些細胞膜上伸出短而小的突起；該細胞為高度分化細胞,，在體外屬于不增殖群,。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞是青光眼病理性損害的主要細胞，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的死亡可導致視功能不可逆損傷,，研究視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞損害的細胞學和分子生物學機制有利于青光眼發(fā)病機制的研究,。 |
包被條件 | PLL(0.1mg/ml) |
培養(yǎng)基 | 含B-27 Supplement、Penicillin,、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 神經(jīng)元細胞樣 |
傳代特性 | 屬于終末分化細胞,；屬于不增殖細胞群 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
具體步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次,；切成約1mm3組織塊,；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min,；
3. 離心,，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間,，置于37°培養(yǎng)箱,。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,，約1-2h,；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,，收集,；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng),。
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通,。
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