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影響人ELISA試劑盒檢測主要原因
閱讀:94 發(fā)布時間:2016-10-6由于人ELISA試劑盒方法靈敏,,特異性強(qiáng)不需要特殊設(shè)備,,所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,。
標(biāo)本的影響
溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性,。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),,人ELISA試劑盒在洗滌過程中往往難以*洗脫,,它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),,即顯藍(lán)色,,產(chǎn)生假陽性[2]。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用,。
標(biāo)本受細(xì)菌污染,。因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
標(biāo)本保存不當(dāng),。在冰箱中保存過久的標(biāo)本,,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、造成假陽性,;為克服上述干擾,,人ELISA試劑盒測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集,;如不能立即測定,5 d內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存,;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,,分布不均,,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,,不可強(qiáng)烈振蕩。
塑料試管能吸附抗原物質(zhì),,樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性,。使用真空采血管;并使用非抗凝標(biāo)本,,肝素抗凝血漿會增加OD值,,EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性,。
標(biāo)本凝固不全,。 在工作中,有時為了爭取時間快速檢測,,ELISA試劑盒常在血液還未開始凝固時即強(qiáng)行離心分離血清,,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,,易造成假陽性結(jié)果,;因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
Profilin 1 前纖維蛋白1抗體
PCNA-Proliferation Marker 增殖細(xì)胞核抗原抗體
phospho-FAK(Tyr925) 磷酸化粘著斑激酶抗體
phospho-PTK2(Tyr576+Tyr577) 磷酸化粘著斑激酶抗體
phospho-PAK1(Thr212) 磷酸化p21激活激酶1抗體
Phospho-PDPK1(Tyr9) 磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 Phospho-PDPK1(Ser396) 磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 Phospho-PDPK1(Ser410) 磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 Phospho-PLC gamma 1(Tyr775) 磷酸化磷酯酶Cγ1抗體
Phospho-PLC gamma 2(Tyr753) 磷酸化磷酯酶Cγ2抗體
Phospho-Paxillin(Tyr88) 磷酸化樁蛋白Paxillin抗體
Phospho-Paxillin(Ser83) 磷酸化樁蛋白Paxillin抗體
Phospho-Paxillin(Ser178) 磷酸化樁蛋白Paxillin抗體
phospho-PKC beta 1/2(Thr500) 磷酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗體 PGRMC 孕激素受體膜相關(guān)元件抗體
Phospho-p63 (Ser395) 磷酸化P63腫瘤抑制基因抗體
人ELISA試劑盒