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  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的原理好像很簡樸,，不過乎固定抗原，添加一抗,、二抗和底物,，間中夾雜著洗滌和封鎖。假如您的背景過高,，懷疑封鎖不充分,，那么您可以嘗試使用更高濃度的封鎖液，或適當(dāng)延長封鎖時(shí)間,。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截很多不同類型的分子相互作用,。另一個(gè)選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封鎖液，后者可協(xié)助洗滌過程中的封鎖,。解決這個(gè)題目的一種方法是使用雞或魚的正常血清,。好的封鎖液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原,、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用,。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，我們是否能獲得有意義的信息,，這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比,。
  假如背景過高，而您懷疑洗滌不夠時(shí),，可以嘗試增加洗滌次數(shù),。這種封鎖液便宜,、不亂，在去除洗滌過程中的一些非特異結(jié)合上很有用,。假如濃渡過高,，或者未準(zhǔn)確稀釋，則會(huì)導(dǎo)致高背景,。常用的蛋白封鎖液包括牛血清白蛋白（BSA）,、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠,。封鎖液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛伏的結(jié)合位點(diǎn),。
 假如您的ELISA試劑盒不幸地碰到了高背景，那么也無需太擔(dān)心,，依次查看ELISA系統(tǒng)中的組分,，并排除可能存在的題目。記住,，非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景,。不外，它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用,。為了防止這一點(diǎn),，切勿使用過多的一抗或二抗。請(qǐng)勿使用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%）,，它會(huì)降低特異結(jié)合,，產(chǎn)生假陰性。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì),。目前主要有兩種類型的封鎖液：蛋白和非離子型去污劑,。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。假如您一直被背景題目所困擾,，那么也許您該花些時(shí)間來優(yōu)化封鎖液,。
Chloramphenicol    氯霉素抗體
C4orf45    4號(hào)染色體開放閱讀款
CARD11    凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體
Cytochrome B    細(xì)胞色素B抗體
COX1    細(xì)胞色素c氧化酶1抗體
CNOT4    細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體
CNOT6    細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體
CNOT8    細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白8抗體
Chondroitin Sulfate    硫酸軟骨素抗體
CA50    上皮類癌相關(guān)抗原抗體
phospho-CPI17 alpha (Thr38)     磷酸化蛋白磷酸激酶PKC/CPI-17抗體
Centromere protein K    著絲粒蛋白K
Transferrin receptor    轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體
ELISA試劑盒