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ELISA試劑盒測定方式我有辦法
閱讀:105 發(fā)布時(shí)間:2016-2-25ELISA試劑盒已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題,,是一種特殊的試劑分析方法,是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù),。ELISA試劑盒該法由種類和變化可分為雙抗體夾心法,、間接法、競爭法,、雙位點(diǎn)一步法,、捕獲法測IgM抗體、應(yīng)用親和素和生物素的ELISA,,今天我們就來看看ELISA試劑盒測定方式總結(jié),。
一、定量測定
ELISA操作步驟復(fù)雜,,影響反應(yīng)因素較多,,特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的一致,,因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA試劑盒,,標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,,繪制時(shí)常用半對數(shù)紙,,以檢測物的濃度為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),,將各濃度的值逐點(diǎn)連接,所得曲線一般呈S形,,其頭,、尾部曲線趨于平坦,中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域,。
二,、定性測定 ELISA試劑盒
定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性",、"陰性"表示,。"陽性"表示該標(biāo)本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無反應(yīng),。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,,即用滴度來表示反應(yīng)的強(qiáng)度,其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn),。ELISA試劑盒在這種半定量測定中,,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),呈陽性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度,。根據(jù)滴度的高低,,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽性,、弱陽性更具定量意義,。