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ELISA試劑盒靈敏度的高低判斷
閱讀:91 發(fā)布時(shí)間:2016-1-27根據(jù)何的統(tǒng)計(jì)與調(diào)查,ELISA試劑盒被廣泛應(yīng)用的原因主要有準(zhǔn)確性高,、靈敏度高,、特異性強(qiáng)的諸多因素。但這些優(yōu)點(diǎn),,并非全部的試劑盒都有具備,,
其實(shí),ELISA靈敏度和檢測(cè)樣本有些關(guān)聯(lián)的,,如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高,,則對(duì)靈敏度要求相對(duì)小一些。如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低,,則必須考慮靈敏度的問題,。
一般來說,試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準(zhǔn)確的,,低于這個(gè)值因?yàn)榕c曲線是個(gè)“S"型結(jié)構(gòu)有關(guān),,所以結(jié)果是有偏差的,,是一種估算。再加上實(shí)驗(yàn)誤差,,所以達(dá)不到理想的效果,。建議選擇試劑盒時(shí),應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值,,而不是試劑盒上寫的靈敏度,。
雖然酶活性調(diào)節(jié)ELISA方法的靈敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大ELISA中,,檢測(cè)的靈敏度遠(yuǎn)比RIA高,。ELISA試劑盒根據(jù)質(zhì)量作用定律。即免疫反應(yīng)所形成的免疫復(fù)合物量與反應(yīng)物濃度成正比,。推測(cè)所檢測(cè)的待測(cè)物分子數(shù)為1。已知1個(gè)摩爾濃度含6.02×1023個(gè)分子,,那么理論推測(cè)酶活性放大ELISA方法的zui低檢測(cè)限可達(dá)1.7×10-24mol/L,。雖然在實(shí)際應(yīng)用中由于反應(yīng)條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響,往往達(dá)不到這個(gè)水平(大于104個(gè)分子),,但表明ELISA在靈敏度方面的改進(jìn)潛力是很大的,。