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酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備之洗滌方式
洗滌在ELISA試劑盒過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟,，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗,。ELSIA 就是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的,。通過(guò)洗滌以清除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),，以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái),?？梢哉f(shuō)在ELISA試劑盒操作中，洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù),，應(yīng)引起操作者的高度重視,，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌，不得馬虎,。
分析洗滌的方式除某些 ELISA 儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種，過(guò)程如下：
(1)浸泡式
a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液,；
b.用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,，即甩去)；
c.浸泡,，即將洗滌液注滿(mǎn)板孔,，放置1-2 分鐘，間歇搖動(dòng),，浸泡時(shí)間不可隨意縮短,；
d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*,，可用水泵或真空泵抽吸,，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；
e.重復(fù)操作c 和d,，洗滌3-4次(或按說(shuō)明規(guī)定),。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間。微量滴定板多采用浸泡式洗滌法,。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液,。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán),，ELISA試劑盒也含親水基團(tuán),，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合，從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合,，并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用,，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài)，從而脫離固相載體,。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫 20,，其濃度可在0.05%-0.2%
之間，高于0.2%時(shí),，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度,。
(2)流水沖洗式流水沖洗法
ELISA試劑盒zui初用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來(lái)水,。洗滌時(shí)附接一特殊裝置,，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖洗 2 分鐘后,，吸干液體,，再用蒸餾水浸泡2 分鐘，吸干即可,。浸泡式猶如盆浴,，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為*,，且也簡(jiǎn)便,、快速。
已有實(shí)驗(yàn)表明,，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌,。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面,，洗滌效果更佳,。
ELISA試劑盒檢測(cè)范圍：ELISA試劑盒人、綿羊,、小鼠,、大鼠、豬,、兔,、山羊,、牛、馬,、豬,、其它動(dòng)物細(xì)胞因子、植物細(xì)胞因子,、骨代謝,、細(xì)胞凋亡、激素內(nèi)分泌,、活性多肽,、肝纖維化、自身抗體,、血栓與止血,、腫瘤、自身抗體科研Elisa檢測(cè)試劑盒,。 
主要用于科研方面，不用于臨床診斷,?？梢杂糜跈z測(cè)各種指標(biāo)。
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