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公司動(dòng)態(tài)

了解細(xì)胞培養(yǎng)基的方法

閱讀:57          發(fā)布時(shí)間:2014-9-15

    了解細(xì)胞培養(yǎng)基的方法影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多,,讓我們先從培養(yǎng)基和血清說(shuō)起,。以前大部門實(shí)驗(yàn)室都是用干粉培養(yǎng)基,但配制過(guò)程就較為繁瑣,,要溶解,、調(diào)pH值,過(guò)濾,,過(guò)程中可能會(huì)產(chǎn)生一些濃度誤差,,而且有些實(shí)驗(yàn)室的水質(zhì)并不理想,所以培養(yǎng)的效果會(huì)有差異,。經(jīng)典的培養(yǎng)基有良多種,,Invitrogen(GIBCO),、Thermo Fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供,。了解細(xì)胞培養(yǎng)基的方法由于試劑,、水、不同批號(hào)的血清之間都存在著差異,。別小看細(xì)胞培養(yǎng),,這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問(wèn)。選擇你感愛好的細(xì)胞類型,,它就會(huì)彈出推薦的培養(yǎng)基,、血清和轉(zhuǎn)染試劑等,有時(shí)還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染步驟,,很方便,。 
    假如你是著手建立一種全新細(xì)胞的培養(yǎng)體系,根本找不到任何參考,,那你就得花點(diǎn)時(shí)間自己試驗(yàn)了,。要進(jìn)步培養(yǎng)基的不亂性,可以從培養(yǎng)基和血清兩方面入手,。假如使用液體培養(yǎng)基,,這種人為的誤差會(huì)減少,由于究竟是大批量產(chǎn)業(yè)化出產(chǎn)的,,批間差會(huì)很小,。了解細(xì)胞培養(yǎng)基的方法細(xì)胞培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室里zui常見和zui基本的實(shí)驗(yàn)了,但卻不是zui簡(jiǎn)樸的,。有時(shí)候細(xì)胞狀態(tài)不好,,轉(zhuǎn)染、藥篩這些實(shí)驗(yàn)根本就沒辦法做,??傊琈EM做貼壁細(xì)胞培養(yǎng),、RPMI 1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)會(huì)是一個(gè)好的開始,。 Sigma上也有一個(gè)Media Expert,包括了培養(yǎng)基所有成分的功能描述,、使用推介和參考文獻(xiàn)等,,它仍是一個(gè)解決能手,對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)中的常見題目,,如細(xì)胞貼壁不好,、培養(yǎng)基變色等,它都會(huì)列出可能的原因,,并提供補(bǔ)救辦法,。 HyClone和Invitrogen都在海內(nèi)建立了液體培養(yǎng)基的出產(chǎn)基地,,出產(chǎn)和運(yùn)輸本錢大幅降低,所以現(xiàn)在的價(jià)格也只是50-60元/500ml,,比干粉培養(yǎng)基貴不了多少,,而且還幫你省了過(guò)濾器和時(shí)間。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會(huì)貴很多,,以前是這樣,,但現(xiàn)在非也。有時(shí)候你會(huì)驚奇地發(fā)現(xiàn)你的*培養(yǎng)前提與文獻(xiàn)報(bào)道的不同,,就算是統(tǒng)一種培養(yǎng)前提,細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)也時(shí)好時(shí)壞,,這是很正常的,。你也可以購(gòu)買幾種培養(yǎng)基來(lái),然后花大約兩周的時(shí)間做一個(gè)簡(jiǎn)樸的細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn),,來(lái)選擇其中的,。其中DMEM、RPMI 1640,、MEM,、DMEM/F12都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基?;蛘哒业较嚓P(guān)的文獻(xiàn),,作為參考。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,,很可能在DMEM或M199中同樣很輕易生長(zhǎng),。

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