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現(xiàn)貨供應人脂蛋白脂酶(LPL) ELISA 檢測試劑盒

閱讀:240          發(fā)布時間:2012-11-14
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人脂蛋白脂酶(LPL) ELISA 檢測試劑盒
本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿
 
本公司專業(yè)elisa試劑盒供應商/代理商,,質(zhì)量保證,價格低,是國家重點實驗室及國內(nèi)各大院校長期供應商,,
各種種屬 :人,、大小鼠、豚鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛,、羊,;標本 :血清、血漿,、細胞上清液,、尿液、體液,、灌洗液,、腦脊髓、心房水,、胸房水等 ,;本公司實驗室*提供代測服務,詳細信息?。?6- / 31255782
/
86-
:www.shfsbio.com
試驗原理:
LPL試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知LPL濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將LPL和生物素標記的抗體同時溫育,。洗滌后,,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,,去除未結合的酶結合物,,然后加入底物A、B,,和酶結合物同時作用,。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中LPL的濃度呈比例關系,。
 
試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制
96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型
塑料膜板蓋1塊半塊即用型
標準品:80U/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀
空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型
標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型
生物素標記的抗LPL抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型
親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型
洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋
底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
 
自備材料
1.蒸餾水,。
2.加樣器:5ul、10ul,、50ul,、100ul,、200、500ul,、1000ul,。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。
 
安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A,、B,。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗,。
2.實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
 
操作注意事項
1.試劑應按標簽說明書儲存,,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,,不可保存,。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
7.底物A應揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值,。
8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。
9.按照說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作。
 
樣品收集,、處理及保存方法
1,、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2,、血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4,、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
 
試劑的準備
1.標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻,。稀釋比例按下表中進行:
80 U/L(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul,。
40 U/L(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
20 U/L(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
10 U/L(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
5.0 U/L(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
2.5 U/L(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0 U/L(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
 
2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋,。
 
操作步驟
1.使用前,,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔,。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
7.每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘,。避免光照。
8.取出酶標板,,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值,。
 
建議使用的實驗方案
標準品濃度(U/L)
A8080樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
B4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
C2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
D1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
E5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
F2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品
 
 
局限
6號標準品以上的結果為非線性的,,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。
 
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品,。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與人其它細胞因子反應,。
3. 重復性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%,。
 
結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
 
2,、以吸光度OD值為縱坐標(Y),,相應的LPL標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,,樣品的LPL含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
 
3,、檢測值范圍:0-80U/L
 
4、敏感度: 0.1 U/L
豬白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒Porcine Interleukin 5,IL-5 ELISA試劑盒
豬層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒Porcine Laminin,LN ELISA試劑盒
豬Ⅱ型膠原(Col Ⅱ) ELISA試劑盒 Porcine Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA試劑盒
豬可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒 Porcine soluble E-selectin,sE-selectin ELISA試劑盒
豬白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 Porcine Interleukin 13,IL-13 ELISA試劑盒
豬轉化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒 Porcine Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA試劑盒
豬E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒Porcine E-Selectin ELISA試劑盒
豬褪黑素(MT)ELISA試劑盒Porcine Melatonin,MT ELISA試劑盒
豬白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒Porcine Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA試劑盒
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA試劑盒Porcine epidemic diarrhea virus antibody,PEDV ELISA試劑盒
豬傳染性胃腸炎病毒抗體(TGEV)ELISA試劑盒Porcine Transmissible Gastroenteritis virus antibody,TGEV ELISA試劑盒
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒Porcine cardiac troponin Ⅰ,cTn-ⅠELISA試劑盒
豬葡萄糖轉運蛋白2(GLUT2)ELISA試劑盒 Porcine Glucose transporter 2,GLUT2 ELISA試劑盒
豬二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒Porcine diamine oxidase,DAO ELISA試劑盒
豬膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒 Porcine cholecystokinin,CCK ELISA試劑盒
豬腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒Porcine Intestinal trefoil factor,ITF ELISA試劑盒
豬活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒 Porcine Activin A,ACV-A ELISA試劑盒
豬主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)ELISA試劑盒 swine major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠ ELISA試劑盒
豬β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 Porcine Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA試劑盒
豬食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒Porcine Orexin receptor,OXR ELISA試劑盒
豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒Porcine Orexin B,OX-B ELISA試劑盒
豬白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 Porcine Interleukin 1α ,IL-1α ELISA試劑盒
豬促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒Porcine gastrin receptor,GsaR ELISA試劑盒
豬生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒Porcine growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA試劑盒
豬地塞米松(Dex)ELISA試劑盒Porcine Dexamethasone,Dex ELISA試劑盒
豬D二聚體(D2D)ELISA試劑盒Porcine D-Dimer,D2D ELISA試劑盒
豬髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒Porcine myeloperoxidase,MPO ELISA試劑盒
豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒Porcine Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA試劑盒
豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒Porcine von Willebrand Factor,vWF ELISA試劑盒
豬黑色素瘤轉移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒Porcine melanoma metastasis surface adhesion molecule,MMSAM ELISA試劑盒
豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒Porcine soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISA試劑盒
 

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