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   人（human）維生素B12（Vitamin B12）說明書  
本試劑盒僅供研究使用      標(biāo)本：血清或者血漿

一、 試 劑 組 成
精密度微孔板96孔 （Microtitration Strips） 1塊 2～8℃干燥保存
酶標(biāo)偶合液 （Conjugate ）    1瓶 12.0毫升 2～8℃冷藏保存
標(biāo)準(zhǔn)品 （Standard） 5瓶 各1.0毫升 2～8℃冷藏保存
呈色劑A （Substrate A）  1瓶 6.0毫升 2～8℃避光冷藏保存
呈色劑B （Substrate B）  1瓶 6.0毫升 2～8℃避光冷藏保存
終止液 （Stopping Solution） 1瓶 6.0毫升 室溫保存
20倍濃縮洗滌液 （Rinsing Buffer x 20） 1瓶 60.0毫升 2～8℃冷藏保存
5倍濃縮樣品稀釋液 （Diluent x 5） 1瓶 15.0ml 2～8℃冷藏保存
英文說明書,，中文說明書  各一份 室溫保存

 人（human）維生素B12（Vitamin B12）說明書 二,、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用,，試劑應(yīng)視為傳染物,，不同總批號的試劑不能混用。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,。室溫放置至少30分鐘,，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘,。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,，請于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃,。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融,。
6． 在反復(fù)清洗微孔板,，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低度,，造成吸光度偏離的假像,。
7． 加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,，以便使孔中的液體充分混勻,。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍,，有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示,。

三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,，室溫放置至少30分鐘,。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器,，吸頭,，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,，充分混勻待用,。）

 人（human）維生素B12（Vitamin B12）說明書 四,、操 作 步 驟
1．取出酶標(biāo)板，設(shè)空白孔,，依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中（空白孔視為0號標(biāo)準(zhǔn)品,，用醫(yī)用蒸餾水替代）
2、分別標(biāo)記樣品編號,，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）,。
3、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘,；
4,、將酶標(biāo)板板取出，將其中的液體甩去,，每個(gè)孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,，立即甩去液體;
5、每個(gè)孔中加滿應(yīng)用洗滌液后,，輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
6,、重復(fù)第5個(gè)步驟5次,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
7,、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液,。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘,。
9,、將酶標(biāo)板取出,，將其中的液體甩去,，每個(gè)孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體,。
10,、每個(gè)孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后，室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干,。
11、重復(fù)第5個(gè)步驟5次,，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干,。
12、在每個(gè)孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl,。輕輕振蕩混勻,。（A液,、B液采用不同的吸頭加樣）
13、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘,。
14,、每個(gè)微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻,。
15,、在酶標(biāo)儀上，450nm處測定OD; 顯色后,，15分鐘內(nèi)進(jìn)行測定,。
16、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線,，計(jì)算樣本含量

五,、結(jié) 果 判 斷
1. 儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值；
2,、檢測值范圍：0－160IU/ml
3,、敏感度：0.5IU/ml

小鼠羥脯氨酸（Hyp）ELISA試劑盒 Mouse hydroxyproline,Hyp ELISA試劑盒
小鼠骨保護(hù)素配體（OPGL）ELISA試劑盒 Mouse Osteoprotegerin Ligand,OPGL ELISA試劑盒
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白（LF/LTF）ELISA試劑盒 Mouse Lactoferrin,LTF/LF ELISA試劑盒
小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA（EMA IgA）ELISA試劑盒 Mouse anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA試劑盒
小鼠鐵蛋白（FE）ELISA試劑盒 Mouse ferritin,FE ELISA試劑盒
小鼠碳酸酐酶2（CA-2）ELISA試劑盒 Mouse carbonic anhydrase 2,CA-2 ELISA試劑盒
小鼠色素上皮衍生因子（PEDF）ELISA試劑盒 Mouse pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA試劑盒
小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8（ADAM8）ELISA試劑盒 Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA試劑盒
小鼠抗胰蛋白酶（AT）ELISA試劑盒 Mouse Anti-trypsin,AT ELISA試劑盒
小鼠胰島細(xì)胞抗體（ICA）ELISA試劑盒 Mouse islet cell antibody,ICA ELISA試劑盒