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人α-銀環(huán)蛇毒素（α-BGT）ELISA試劑盒使用說明書
　　本試劑盒僅供研究使用,。
藥品名稱：
通用名：人α-銀環(huán)蛇毒素（α-BGT）酶聯(lián)免疫分析試劑盒
使用目的：
　　　本試劑盒用于測定人血清,，血漿及相關(guān)液體樣本中α-銀環(huán)蛇毒素（α-BGT）含量。
實驗原理
　　　本試劑盒應(yīng)用間接法測定標本中人α-銀環(huán)蛇毒素（α-BGT）水平。用純化的人α-銀環(huán)蛇毒素（α-BGT）抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的α-銀環(huán)蛇毒素（α-BGT）標準品和未知濃度的α-BGT待檢樣品，溫育后,，加入生物素標記的抗IgG抗體,，再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合，形成免疫復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的α-銀環(huán)蛇毒素（α-BGT）呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人α-銀環(huán)蛇毒素（α-BGT）濃度,。
試劑盒組成
人α-銀環(huán)蛇毒素（α-BGT）ELISA試劑盒使用說明書
1 20倍濃縮洗滌液 50ml×1瓶  
 
9 標準品S1（180 ng/L） 0.5ml×1瓶
2 鏈霉親和素-HRP 6ml×1瓶  標準品S2（120 ng/L） 0.5ml×1瓶
3 酶標包被板 12孔×8條  標準品S3（60 ng/L） 0.5ml×1瓶
4 生物素標記的抗-IgG抗體 6ml×1瓶  標準品S4（30 ng/L） 0.5ml×1瓶
5 顯色劑A液 6ml×1瓶  標準品S5（15ng/L） 0.5ml×1瓶 
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 10 密封袋 1個
7 終止液 6ml×1瓶 11 封板膜 3張
8 樣品稀釋液 6ml×1瓶 12 說明書 1份
 
標本要求
人α-銀環(huán)蛇毒素（α-BGT）ELISA試劑盒使用說明書
1．不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
操作步驟
1．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
2． 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品,，其余各步操作相同）,、標準品孔、待測樣品孔,。然后在標準品孔中加入標準品50μl,，在樣本反應(yīng)孔中先加入待測樣品10μl再加入樣品稀釋液40μl（樣品zui終稀釋度為5倍），蓋上封板膜,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘,。
3． 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4． 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)4次，拍干,。
5． 加生物素標記的抗-IgG抗體：每孔加入生物素標記的抗-IgG抗體50μl,。37℃溫育30分鐘
6． 洗滌：操作同4。
7．加鏈霉親和素-HRP：每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘。
8． 洗滌：操作同4,。
9．顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl,，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10．終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11．測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
 
計算
　　  以標準物的濃度為橫坐標,，OD值為縱坐標,，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值待入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度,。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果,。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
4．  如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值）,，請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
5．  封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準。
線形范圍：
　　10ng/L-200ng/L
規(guī)格：
　　96人份/盒
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：,；2-8℃,。
2．有效期：6個月
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